動脈壁におけるマクロファージ増殖の細胞内情報伝達機構の解析

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09671065
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 七里 元亮 熊本大学, 医学部, 教授 (00028515)
• 研究分担者: 豊永 哲至 熊本大学, 医学部, 助手 (60295128) ; 城谷 哲也 熊本大学, 医学部附属病院, 助手 (30274715)
• キーワード: マクロファージ / 泡沫細胞 / 細胞増殖 / 動脈硬化 / スカベンジャー受容体 / 酸化LDL / lysophohsphatidylcholine / protein kinase C

研究概要

本年度の研究実績は以下の4点を明らかにしたことである。
1)酸化LDLによるマクロファージ(M_Φ)増殖におけるスカベンジャー受容体経路の重要性。スカンベンジャー受容体の拮抗阻害剤がM_Φ増殖を抑制すること、およびスカベンジャー受容体ノックアウトM_Φの増殖が野生型の30%であることから明らかにした。
2)酸化LDLによるM_Φ増殖の細胞内シグナルの解析。
M_Φ増殖の情報伝達経路に関して、酸化LDLの添加により一過性に細胞内カルシウムの上昇を認め、このとき百日咳毒素を添加するとカルシウム上昇とM_Φ増殖が抑制された。またCキナーゼ活性も一過性に上昇するが、Cキナーゼ阻害剤によりM_Φ増殖が抑制された。以上の結果から、酸化LDLによるM_Φ増殖のシグナルとして、百日咳毒素感受性G蛋白質を介するホスホリパーゼCの活性化に続く小胞体からのカルシウム放出、さらにCキナーゼの活性化に至る経路が考えられた。スカベンジャー受容経路で取り込まれたリゾリ脂質はCキナーゼのカルシウム感受性を変化させ活性化に関与すると考えられた。
3)酸化LDLによるM_Φ増殖におけるGM-CSFの重要性。
酸化LDLによるM_Φ増殖GM-CSFのモノクローナル抗体で有意に抑制された。また酸化LDLはGM-CSF産生を有意に誘導した、これらの結果から、酸化LDLはGM-CSFの産生を介してM_Φ増殖を誘導している可能性が考えられた。
4)メバロン酸代謝産物のM_Φ増殖に対する関与。
酸化LDLによるM_Φ増殖はHMG還元酵素阻害剤の同時添加により完全に抑制された、この抑制は、メバロン酸の添加により解除されるが、スクワレンやコレステロール添加では解除されず、メバロン酸代謝産物がM_Φ増殖に重要であることが示された。

研究成果

• [文献書誌] Sakai, M.: "Role of the macrophage scavenger receptor for internalization of lysophosphatidylcholine in oxidized low density lipoprotein-induced macrophage growth." Ann. N. Y. Acad. Sci.811. 387-384 (1997)
• [文献書誌] Sakai, M.: "HMG-CoA reductase inhibitors suppress macrophage growth induced by oxidized low density lipoprotein." Atherosclerosis. 133. 51-59 (1997)
• [文献書誌] Yano, T.: "β-very low density lipoprotein induces Triglyceride-accumulation through receptor-mediated endocytic pathway in 3Tз-L1 adipocytes" Atherosclerosis. 135. 57-64 (1997)
• [文献書誌] Anami, Y.: "Human β-migrating very low density lipoprotein induces foam cell formation in human mesangial cells" Atherosclerosis. 135. 225-234 (1997)
• [文献書誌] Matsumura, T.: "Two intracellular signaling pathways for activation of protein kinase C are involved in oxidized low density lipoprotein-induced macrophage growth." Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol.17. 3013-3020 (1997)
• [文献書誌] Sakai, M.: "Endocytosed lysophosphatidylcholine through the scavenger receptor plays an essential role in oxidized low density lipoprotein-induced macrophage growth." Trend Cardiovasc. Med.(in press).