インスリン依存型糖尿病のβ細胞障害における膵島抗原の役割に関する研究

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09671085
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: (財)冲中記念成人病研究所
• 研究代表者: 小林 哲郎 財団法人冲中記念成人病研究所, 研究員 (30113442)
• 研究分担者: 中西 幸二 財団法人冲中記念成人病研究所, 研究員 (80211423)
• キーワード: Soluble HLA / インスリン依存型糖尿病 / Slowly progressive IDDM / エピトープ / CAD抗体

研究概要

本年度は膵島抗原の発現に及ぼすHLA分子の影響を検討する目的で、soluble HLA(S-HLA)の血中動態に関して検討を加えた。発症前後から経時的に採血したIDDM患者の血中S-HLAの濃度は発症と同期して低下し、数ケ月間の後、正常化した。soluble HLAはIDDMの抗原提示において防御的な影響を与える可能性が示唆された。この成績はClin Immun and Immunopathol 85:246-252,1997に発表された。
次いで、IDDM患者における膵島抗原反応性自己抗体の特徴を明らかにする目的で、自己抗体のエピトープマッピングを行った。膵島抗原反応性自己抗体はIDDM患者[急性発症IDDM,および、slowly progressive IDDM(SPIDDM)]に検出されるGAD抗体(GADAb)を対象にとした。エピトープを明らかにするため、GAD67およびGAD65からなる3種のキメラ[GAD65(1-244)AA/GAD67(253-369)AA/GAD65(360-585)AA:GAD-A,GAD65(1-442)AA/GAD67(452-594AA:GAD-E,GAD65(1-537)AA/GAD67(547-594)AA:GAD-G]クローンを作成した。このキメラクローンによりGADのキメラ蛋白をin vitro transcription/translationにより作成し、IDDM患者血清との反応を免疫沈降法により検討した。その結果(1)急性発症IDDMにおいてはその大部分のエピトープがGAD65分子の中心側(244〜360位AA)に存在することが明らかとなった。さらに一部で症例では中心側に加えて422〜585位AAがエピトープでもあった。(2)SPIDDMにおけるGAD抗体のエピトープはGAD65分子の244位AAよりさらにンN端側にも存在することも示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Koji Nakanishi: "Synchronous decline of serum-soluble HLA class I antigen and β-cell function in insulin-dependent diabetes mellitus." Cline Immun and Immunopathol. 85. 246-2252 (1997)
• [文献書誌] Tetsuro Kobayashi: "In situ characterization of islets in diabetes with a mitochondrial DNA mutation at nucleotide position 3243." Diabetes. 46. 1567-1571 (1997)
• [文献書誌] Tetsuro Kobayashi: "Mutation at nucleotide position 3243 of the mitochondrial DNA as a cause of IDDM-a meta-analysis-response." Diabetologia. 40. 1495-1496 (1997)