| 研究概要 |
1. ヒト正常造血細胞の分化・増殖と細胞周期制御:昨年度p21CIPlならびにp27KIP2のmRNAを解析するcompetitive RT-PCRによって臍帯血CD34陽性細胞由来コロニーでの発現を解析した.今回は,蛋白レベルでの検討を免役細胞染色ならびに組織染色で解析した.p21CIPlは分化とともにmRNAの上昇は検出されたにもかかわらず,蛋白レベルでは必ずしも検出されるほど高レベルでの発現は見られなかった.正常もしくは本態性血小板血症患者の骨髄の免疫組織染色では,巨核球にのみp21CIPl蛋白が検出され,Ki-67染色との比較から,細胞周期停止(多倍体化終了)時期に一過性に蛋白が発現している可能性が示された.巨核球以外では,マクロファージコロニーや末梢血の単球でかろうじてp21CIPl蛋白が検出され,単球ではウエスタン解析でも確認された.p27KIPlに関しては,骨髄では巨核球で検出され,Ki-67陰性細胞に陽性であり,細胞周期停止後蛋白が持続的に発現していることが示された.その他に,免疫グロブリン軽鎖陽性細胞(形質細胞)や血管内皮細胞に陽性であった.末梢血ではリンパ球以外に単球でも低レベルの発現が検出された.以上からリンパ球以外の造血では,巨核球においてp21CIPlとp27KIPlが終末分化に密接に関連して発現していることが明らかになった.
2. ヒト造血細胞の腫瘍化と細胞周期制御因子:上記と同様のcompetitive RT-PCRで血液腫瘍患者由来検体と細胞株を解析したが,INK4遺伝子群に見られるほどの発現レベルの変化はなく極く少数の例で発限低下が見られた.その発現レベルには,これまで解析したサイクリンDやINK4遺伝子群の発現との関連を見いだすことはできなかった.
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