| 研究課題/領域番号 |
09671231
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
善甫 宣哉 山口大学, 医学部, 助教授 (00206666)
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| 研究分担者 |
藤岡 顕太郎 山口大学, 医学部・附属病院, 助手 (80238542)
江里 健輔 山口大学, 医学部, 教授 (10034943)
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| キーワード | 内膜肥厚 / MT-MMP-1 / RT-PCR / アンチセンスオリゴヌクレオチド / 遺伝子治療 |
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| 研究概要 |
1. MT-MMP-1およびGAPDH遺伝子発現
RT-PCRによるMT-MMP-1遺伝子発現は、無傷害(コントロール)のラット頚動脈ではほとんどみられなかった。バルーン傷害後1日目より遺伝子発現が上昇し、4日目に最高値を示した。その後、8日目、14日目に発現は漸減した。一方、GAPDHは各時期とも一定の遺伝子発現を示した。
2. MT-MMP-1遺伝子の定量評価
GAPDHに対するMT-MMP-1遺伝子の相対的発現量は、無傷害(コントロール)では23と低値であった。1日目では80と上昇し、4日目では164と最高値を示した。その後、8日目では136、14日目では54と漸減した。
3. 培養ラット平滑筋細胞の増殖抑制効果
antisense、sense、missense MT-MMP-1オリゴヌクレオチドは以下のとおり設計された。
antisense 1: 5′-AGA CAT GGT CCC CGG CGT CG-3′
antisense 2: 5′-AGA CAG CAA GGA CCA CTG CC-3′
sense 1: 5′-CGA CGC CGG GGA CCA TGT CT-3′
sense 2: 5′-GGC AGT GGG CCT TGC TGT CT-3′
missense: 5′-GGC TGA TCG CCG TAA GCG CC-3′
現在、上記antisense 1、antisense 2、sense 1、sense 2、missenseオリゴヌクレオチドを用いて培養平滑筋細胞の増殖アッセイ(MTT法)を行っている。
4. 培養ラット平滑筋細胞の遊走抑制効果
現在、上記antisense 1、antisense 2、sense 1、sense 2、missenseオリゴヌクレオチドを用いて培養平滑筋細胞の遊走アッセイ(Boyden chamber法)を行っている。
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