特異的免疫学的寛容状態の誘導:胸膜外T細胞分化とCD8細胞のフェノタイプの解析

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09671238
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 山口 康雄 熊本大学, 医学部, 助教授 (90253757)
• 研究分担者: 守 且孝 熊本大学, 医療技術短期大学部, 教授 (10040213) ; 小川 道雄 熊本大学, 医学部, 教授 (30028691)
• キーワード: liver transplantation / DST / CD45RC / CD4^+T cell / CD8^+T cell / IL-10 / TGF-β / IL-18

研究概要

移植前ドナー抗原投与(ヘパリン加ドナー新鮮血1mL:donor-specific blood transfusion (DST))により、ラット同種同所性移植肝は免疫抑制在を全く必要とせず、有意に生着延長した。拒絶群とDST群における血中のサイトカイン濃度をELISA法にて測定した。拒絶群ではtumor necrosis factor(TNF)-α、interferon (IFN)-γ、cytokine-induced neutrophil chemoattractant (CINC)などの血中濃度が移植後5日目をピークに著増し、以後漸減した。一方、DST群ではこれらの血中濃度は有意に低かった。FACS解析にて移植肝内にはCD45RC^+CD4^+T細胞とCD45RC^-CD4^+T細胞の2種類のフェノタイプが存在することが判明した。PCR法にてCD45RC^+CD4^+T細胞とCD45RC^-CD4^+T細胞は、それおぞれIL-2、IFN-γ及びIL-4、IL-10のmRNAを発現しており、Th1及びTh2であることが示唆された。DST群ではTh2/Th1の比率が拒絶群に比し有意に高かった。同様に移植肝内のCD8^+T細胞にはCD45RC^+CD8^+T細胞とCD45RC^-CD8^+T細胞の2種類のフェノタイプが存在し、それぞれIL-2及びIL-4、IL-10のmRNAを発現しており、Tc1一及びTc2と考えられた。Tc2は僅かながらIFN-γmRNAを発現していた。Northern blot法にて移植肝における各種サイトカインの経日的発現を検索した。拒絶群ではIL-12、TNF-α、DST群ではIL-10、TGF-βの発現が有意に増強した。また、DST群ではhepatocyte growth factor (HGF)の発現が拒絶群に比し有意に強かった。IL-10、TGF-β、HGFなどの添加によりT細胞表面上のCD45RCの表出は有意に抑制された。また、拒絶群ではinterferon-γ-inducing -factor (IGIF : IL-18) mRNAの発現が増強していたが、DST群ではその発現が有意に抑制されていた。以上のようにDST群ではanti-inflammatory cytokineが産生され、T細胞表面のCD45RCの発現に影響を及ぼすとともに、Th2及びTc2細胞の誘導に関与していることが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Miyanari N, Yamaguchi Y, et al.: "Persistent infiltration of CD45RC^-CD4^+ T cells, Th2-like effector cells, in prolonging hepatic allografts in rats pretreated with a donor specific blood transfusion." Hepatology. 25. 1008-1013 (1997)
• [文献書誌] Goto M, yamaguchi Y, et al.: "Phenotype and localization of macrophages expressing inducible nitric oxide synthase in rat hepatic allograft rejection." Transplantation. 64. 303-310 (1997)
• [文献書誌] Yamaguchi Y, Ichiguchi O, et al.: "Enhanced expression of cytokine-induced neutrophil chemoattractant in rat hepatic allografts during acute rejection." Hepatology. 26. 1546-1552 (1997)
• [文献書誌] Yamaguchi Y, Matsumura F, et al.: "Monocyte chemoattractant protein-1 enhances expression of intercellular adhesion molecule-1 following ischemia-reperfusion of the liver in rats." Hepatology. 27. 727-734 (1997)
• [文献書誌] Ichiguchi O, Yamaguchi Y, et al.: "Nitric oxide synthesis is suppressed in prolonging rat hepatic allografts pertreated with a donor specific blood." Transplantation. (in press). (1998)
• [文献書誌] Ichiguchi O, Yamaguchi Y, et al.: "Prolonged survival of rat hepatic allografts treated with a pretransplant donor-specific blood transfusion is associated with reduced cytokine-induced neutrophil chemoattractant expression." Transplantation. (in press). (1998)