放射線感受性EGRIプロモーターを用いた大腸癌の化学-照射-遺伝子治療法の開発

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09671276
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 石井 誠一 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (60221066)
• 研究分担者: 石井 恵子 東北大学, 医学部・附属病院, 講師 (00291253) ; 舩渡 忠男 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (70165455) ; 高井 良尋 東北大学, 医学部・附属病院, 助教授 (50107653) ; 椎葉 健一 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (90196345) ; 溝井 賢幸 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (90271949)
• キーワード: 大腸願 / 遺伝子治量 / EGRI

研究概要

本研究は放射線感受性EGRIプロモーターを用いて、進行大腸癌に対する新しいChemo-Radio-Gene Therapyを開発することを目的とする。すなわち放射線感受性EGRIプロモーターを用いてCytosine deaminase mRNAを発現させるベクターを作成し、ベクターを大腸癌細胞に導入して照射を加え、Cytosine deaminaseを腫瘍細胞に発現させる。これによりprodrugである5-fluorocytosine(5-FC)が5-fluorouracil(5-FU)に変換され、腫瘍局所に照射と化学療法が集積される。さらに局所における5-FUの増感作用も期待される
・EGRIプロモーターを含む領域を既に報告されているプライマーを用いてPCR法で増幅。
・同様にCytosine deaminase遺伝子を増幅。
・得られたDNAフラグメントをクローニングキットに組み込み、さらに増幅。
・クローニングサイトにEGRIプロモーターをリンクしたベクターを作製し、さらにEGRIプロモーター下流にCytosine deaminase遺伝子をリンクしたアデノウイルスベクターの作製を企図した。
結果としてEGRIプロモーターおよびCytosine deaminase遺伝子を組み込んだベクターの作製に手間取り、in vitro ,in vivoにおける解析を行うには至らなかった。