研究課題
基盤研究(C)
本研究は放射線感受性EGR1プロモーターを用いて、進行大腸癌に対する新しいChemo-Radio-Gene Therapyを開発することを目的とする。すなわち放射線感受性EGR1プロモーターを用いてCytosine deminase mRNAを発現させるベクターを作成し、ベクターを大腸癌細胞に導入して照射を加え、Cytosine deaminaseを腫瘍細胞に発現させる。これによりprodrugである5-fluorocytosine(5-FC)が5-fluorouracil(5-FU)に変換され、腫瘍局所に照射と化学療法が集積される。さらに局所における5-FUの増感作用も期待される・EGR1プロモーターを含む領域を既に報告されているプライマーを用いてPCR法で増幅。・同様にCytosine deaminase遺伝子を増幅。・得られたDNAフラグメントをクローニングキットに組み込み、さらに増幅。・クローニングサイトにEGR1プロモーターをリンクしたベクターを作製し、さらにEGR1プロモーター下流にCytosine deaminase遺伝子をリンクしたアデノウイルスベクターの作製を企図した。結果としてEGR1プロモーターおよびCytosine deminase遺伝子を組み込んだベクターの作製に手間取り、in vitro, in vivoにおける解析を行うには至らなかった。
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