| 研究概要 |
p16^<INK4a>発現アデノウイルスベクターの膵癌細胞における発現と細胞増殖抑制効果
p16^<INK4a>cDNA(0.8kb)をPCR cloning法によりcloningし、これをコスミッドカセットDNAのSwa-1 siteにIn vitro package法により組み込み、さらに、これをEco T221にて切断された親アデノウイルスと293細胞にco-transfectし、組換えウイルスを分離しp16^<INK4a>発現アデノウイルスベクターを作製した。P16^<INK4a>のhomozygous deletionが確認された膵癌培養細胞株;MIAPaca-2に対し、このP16^<INK4a>発現アデノウイルスベクターによりp16^<INK4a>遺伝子導入を行った。実際にp16^<INK4a>遺伝子導入されたMIAPaca-2にp16^<INK4a>遺伝子のRNAレベル、タンパクレベルの高度の発現が見られることを確認した。P16^<INK4a>発現が確認された膵癌培養細胞株;MIAPaca-2とコントロールとしてのアデノウイルス添加されたMIAPaca-2の細胞増殖曲線を比較したがp16^<INK4a>発現によりMIAPaca-2の細胞増殖は有意に抑制された。
p16^<INK4a>発現アデノウイルスベクターによる食道癌細胞増殖抑制効果
食道癌細胞(TT,TTn)において、同様の検討を行ったが食道癌細胞においてはp16^<INK4a>発現アデノウイルスベクターによる増殖抑制効果は確認できなかった。
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