| 研究概要 |
膵胆管合流異常には胆管系の悪性腫瘍が合併することが知られている。ハムスターにおいて開発された胆嚢十二指腸吻合及び総胆管結紮による膵胆管合流異常モデルは,N-nitrosobis(2-oxopropyl) amine (BOP)を投与すると,膵管癌,肝内胆管癌のみならず肝外胆管癌,胆嚢癌が誘発される。今回は膵胆管合流異常モデルでの発癌過程における遺伝子変異の関与を検索する目的で,肝外胆管癌,膵管癌のK-ras, p53遺伝子の点突然変異を調べた。【材料及び方法】6週齢の雌性シリアンゴールデンハムスターに,エーテル麻酔下に胆嚢十二指腸吻合及び総胆管結紮切離を施行した。術後4週目より週1回10mg/kgのBOPを9回皮下投与した。初回BOP投与後,20週目に屠殺し,肉眼的に明らかな膵腫瘍及び肝外胆管癌の一部を組織学的検索のためH-E染色用にホルマリン固定し,一部は遺伝子学的検索のため,液体窒素にて凍結保存した。K-ras, p53遺伝子点突然変異はRT-PCR-SSCP法にて解析し,異常バンドについてはdirect sequence法にて塩基配列を調べた。【結果】肝外胆管癌は55.9%,膵管癌は67.6%の頻度で組織学的に認められた。肉眼的に明らかな肝外胆管癌8例,膵管癌11例につきK-ras, p53遺伝子変異を検索した。K-ras遺伝子変異は,肝外胆管癌で8例中6例(75%),膵管癌で11例中6例(54.5%)に認められた。direct sequence法では全例にK-ras exon 1のcodon12にGGT→GATの点突然変異が証明された。それに対し,p53 exon5-7には遺伝子変異は認められなかった。以上より,膵胆管合流異常の発癌過程においては,K-ras mutationは重要な役割を果たすが,p53の関与は少ないことが示唆された。
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