生体内遺伝子導入法による肺障害の病態の解析と治療-閉塞性細気管支炎におけるエンドセリンの関与とその制御

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09671378
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 武田 伸一 大阪大学, 医学部, 助手 (30236468)
• 研究分担者: 尹 亨彦 大阪大学, 医学部, 助手 (50283768) ; 奥村 明之進 大阪大学, 医学部, 助手 (40252647) ; 南 正人 大阪大学, 医学部, 助手 (10240847)
• キーワード: Enclothelin(ET) / Bronchiolitis obliterans / Gene Transfer / HVJ / Lung transplantation

研究概要

研究経過 平成10年度
【経過と目的】平成9年度ではHVJ-liposome法による生体内遺伝子導入法で肺組織にET-1geneを導入することで誘発されるOB類似病変を作成した.この成果は米国胸部疾患学会(ATS/ALA)の"Expandingstrategiesandtargetsingenetherapy"のシンポジウムで発表し,OBの実験modelであるという評価を得た.この結果はETantagonist等の治療の可能性を示唆した.さらに肺移植における遺伝子治療の臨床応用を目指した導入法を検討する必要がある. 【方法】体重250gWistarmaleratを使用, FITCでラベルしたoligodeoxynuc1eotides(ODN)をliposome内に封入し,HJ-liposomecomplexを気道(I群)と左肺動脈(II群)から投与した.次に肺移植時の前潅流法を利用してexvivoに移植肺にHJ-liposomecomplexを投与した(III群).III群では次にcufftechniqueによる左肺同種移植(Wistar-Wistar)を施行した.3群とも投与後3日にratを犠牲死させて肺組織への導入の程度を螢光顕微鏡で観察した.【結果】I群で気管支上皮,肺胞上皮細胞,肺胞macrophageにFITCの発現が認められた.II群では肺胞上皮細胞,肺胞macrophageにFITCの発現が認められたが,肺血管内皮での発現は明らかではなかった.III群では虚血再潅流,HJ-liposomecomple投与に伴う影響が起因する肺組織障害が認められた.肺組織障害の軽微(or無し)での移植肺での発現を検討すべく実験を継続中である.

研究成果

• [文献書誌] Shinichi Takeda: "Pulnonary disease models induced by in vivo HVJ-liposer・・・・" J cardiovon Pharmacology. 31. S336-S338 (1998)
• [文献書誌] Hiroki Kisina: "Microvascular permeability of the non-heart-beating rabbit lung・・・" Amals of Thoracic Surgery. 65. (1998)
• [文献書誌] Shinichiro Miyoshi: "Chest size matching in single and double lung transplantation" Jpn J Thoracic Cardiovascular Surgery. (1999)
• [文献書誌] Shinichi Takeda: "Clinical spectrum of congenital cystic disease of the lung in children" Eur J Cardio-thoracic Surgery. 15. 11-17 (1999)