Inverse PCR法を用いた卵管特異糖蛋白質遺伝子プロモーター領域の解析

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09671663
• 研究機関: 山形大学
• 研究代表者: 荒木 慶彦 山形大学, 医学部, 助教授 (70250933)
• キーワード: 卵管 / 糖蛋白質 / プロモーター領域 / マウス / ERE

研究概要

受精の分子機構の解明は、種の存続という生物学上での大きな問題に直接関与し、また最近増加している不妊症患者の病態解明・治療に大きく貢献する知見をもたらす可能性を持っている。近年、ヒトを含めた種々の哺乳動物で卵管に特異的に発現し、配偶子を修飾する活性を持つ糖蛋白質(卵管特異糖蛋白質:OGP)の存在が報告されている。我々は1980年代より、生殖生物学では優れた実験動物であるゴールデンハムスターのOGPを発見し、この物質の生化学的性状・生殖生物学的性状を明らかにしてきた、最近この分子及びマウスにおける homologue のcDNAのクローニングに成功した。本研究では現在までInverse PCR法により、マウスOGP遺伝子のinitiation codonより2371塩基上流の構造解析を行った。その結果、この流域には典型的なTATA boxが存在していなかったが、5上流域にhalf palindromic estrogen responsive element(ERE)が10箇所、またimperfect EREが1箇所存在が判明した。現在この領域のdeletion mutantをluciferase発現ベクターの上流に連結し、この領域のプロモーター活性を解析した結果、エストロゲン依存性のプロモーター活性を持つ領域を明らかにすることに成功した。。

研究成果

• [文献書誌] Tulsiani DRP et.al.: "Mammalian fertilization: A carbohydrate-mediated event." Biology of Reproduction. 57. 487-494 (1997)
• [文献書誌] Nohara M.et.al.: "Partial characterization of the gametes and development of a successful in vitro fertilization procedure and in the mastomys(Praomys coucha): A new species for reproductive biology research" Biology of Reproduction. 58. 226-233 (1998)
• [文献書誌] Araki Y & Yoshida-Komiya H.: "Mammalian oviduct-specific glycoprotein: Characterization and potential role in fertilization process." Journal of Reproduction and Development. 44. 215-228 (1998)
• [文献書誌] Akatsuka K.et al.,: "Rat zona pellucida glycoproteins: Molecular cloning and characterization of the three major components." Molecular Reproduction & Development. 51. 454-467 (1998)
• [文献書誌] Sendai Y,et al.,: "Establishment of germ-line competent embryonic stem cells lacking mouse oviduct-specific glycoprotein gene." Biology of Reproduction. 60:Suppl.1. in press.(1999)