| 研究課題/領域番号 |
09671674
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
井上 卓也 京都大学, 医学研究科, 助手 (90283598)
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| 研究分担者 |
藤原 浩 京都大学, 医学研究科, 講師 (30252456)
佐川 典正 京都大学, 医学研究科, 助教授 (00162321)
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| キーワード | 着床 / CD9 / 絨毛 / 浸潤 / インテグリン / 単クローン抗体 |
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| 研究概要 |
胚の着床および胎盤形成の過程では、ヒト絨毛細胞は子宮内膜上皮に接着した後、脱落膜組織に浸潤していく。その様式は癌細胞浸潤のそれと類似していることが知られているが、絨毛浸潤は癌浸潤と異なりその深度および時期に応じて浸潤能が強く抑制されている。このような、絨毛細胞の浸潤停止機構の解明は、絨毛性疾患、妊娠中毒症、癒着胎盤などの絨毛浸潤の異常に関連する疾患の病態解明において重要な課題であると考えられる。
我々は、白血球分化抗原の一つであるCD9分子が、脱落膜と接して浸潤を停止しているExtravilloustrophoblast(EVT)に特異的に強く発現しており、妊娠後期の卵膜から採取したETVの培養系に抗CD9抗体を作用させたところ、その細胞浸潤能が亢進することを観察した。本研究ではCD9分子の絨毛細胞の浸潤制御機構を更に検討すること目的とした。すなわち、妊娠後期の卵膜から採取したETV及び絨毛癌細胞株BeWoから得た蛋白に対し抗CD9抗体を用いた免疫沈降法を行い、共沈したCD9分子に結合する分子をWestern blott法により検討したところ、ETV及びBeWo細胞においてはIntegrin α3及びα5がCD9分子と結合していることが明らかとなった。次にBeWo細胞にIntegrin α3またはα5に対する中和抗体を添加したところIntegrin α3及びα6の機能を抑制することによりBeWo細胞の浸潤能が抑制された。さらに、抗Integrin中和抗体により浸潤能の抑制されたBeWo細胞に抗CD9抗体を添加すると抗Integrin α3抗体により抑制されたBeWo細胞の浸潤能が回復した。一方、抗Integrin α5抗体により抑制された細胞浸潤能は回復しなかった。
以上の結果より、絨毛細胞の浸潤に深く関与するCD9分子はIntegrin α3及びα5に結合しており、CD9分子はIntegrim α5を介した浸潤抑制機構に関与していることが示された。
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