| 研究課題/領域番号 |
09671679
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
大橋 一友 大阪大学, 医学部, 助手 (30203897)
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| 研究分担者 |
徳川 吉弘 大阪大学, 医学部, 助手 (70283786)
下屋 浩一郎 大阪大学, 医学部, 助手 (40291950)
東 千尋 大阪大学, 医学部, 講師 (20151061)
佐治 文隆 大阪大学, 医学部, 助教授 (90093418)
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| キーワード | ヒト精子 / ヒト卵 / 先体反応 / 受精分子 / CD46 |
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| 研究概要 |
ヒト精子と透明帯除去ハムスター卵を用いた受精系(ハムスターテスト)にCD46の各short consensus repeat(SCR)に対する抗体を作用させた。その結果、SCR3を中心に受精に関与することが判明した。またこの部位は精子と卵の結合ではなく、細胞融合に関与することも判明した。この部位はCD46の麻疹ウイルスのfusion receptorとしての働きをつかさどるものであり、今回の結果は合目的であると考えられる。
次いで精子CD46の精製を抗CD46抗体を用いたアフィニティーカラムで行った。その結果、血管内皮細胞などに発現する43KdのCD46とは違い、35KdのCD蛋白を分離した。この結果は従来の報告と一致するものである。分離したCD46をFITCでラベルし、ハムスター卵ならびにヒト卵表面のCD46結合部位について共焦点レーザー顕微鏡で検討予定である。
現在さらにCD46抗体とFITC-PSAを用いた二重染色による精子先体機能評価を行っている。FITC-PSA染色では精子先体外膜の欠如は同定できるが、受精現象につながる生理的な反応であるかについての評価はできない。この問題を解決すべく抗CD46抗体による先体反応の評価法を開発し、現在その有用性を体外受精症例を用いて検討中である。
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