IGF・Iレセプター・アンチセンス法による子宮頚癌遺伝子治療の基礎的検討

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09671684
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 吉野内 光夫 岡山大学, 医学部・附属病院, 助手 (50261235)
• 研究分担者: 本郷 淳司 岡山大学, 医学部・附属病院, 助手 (10301293) ; 宮木 康成 岡山大学, 医学部・附属病院, 助手 (10273989) ; 児玉 順一 岡山大学, 医学部・附属病院, 助手 (90263582) ; 上村 茂仁 岡山大学, 医学部・附属病院, 助手 (90281154) ; 奥田 博之 岡山大学, 医学部, 助教授 (30033286)
• キーワード: JGF-1 / アンチセンス / 子宮頚癌 / HPV

研究概要

Inslin-like Growth Factor I Receptor(IGF-lR)は多くの腫瘍細胞において形質転換能の獲得と維持に必須である.このIGF-IRのダウンレギュレーシeンにより多くの腫瘍細胞において形質転換能の抑制が得られている.そこでHPV陽性の子宮頚癌でも同様の生物学的効果が得られるか否かを検討した.
HPV18型陽性株Hela S3,HPV16型陽性株SiHa,およびHPV陰性株C33aを材料として温度感受性HSP 70 promotor下に309bpのIGF-IR antisense mRNAを発現するexpression vectorをG418選択下で恒久的に遺伝子導入した.選択したクローンのうち,39℃培養下で有意なIGF-IRの発現抑制が確認されたものをsoft agarに植え,形質転換能の変化を検討した.
C33a株で3週間後にwild typeが約90個のコロニーを形成したのに対し,選択したアンチセンス導入クローンでは14個すべてで0-14個のコロニーしか形成されず,期待どうりの著明な抑制効果が得られた.一方,Hela S3ではwild typeが2週間後に280個前後のコロニーを形成したのに対し,同様に選択した11個のクローンでは14-160個までとクローン間での著しい差異が認められた.これらのクローンの39℃におけるレセプター発現レベルをウェスタンブロットにて確認すると,形質転換能抑制効果と密接に関連していた.HPV16型陽性株SiHaにおける結果も同様であった.
以上のことから,アンチセンス法で充分にIGF-IR発現を抑制すれば,HPVの有無や型にかかわらず,子宮頚癌細胞株の形質転換能を抑制でき,IGF-IRは子宮頚癌に対する遺伝子治療の標的として期待しうるとの結論が得られた.

研究成果

• [文献書誌] Akihiko Seki: "Amplification of the mdn-2 gene and p53 abnormalities in retesime sarcimids" Int J. Cancer. 73. 33-37 (1997)
• [文献書誌] Junichi Kodama: "Plants growth factor is absodontly expressed in human certical squamoas cell carcinoma." Eur. J. Gynaec. Oncol.18・6. 508-510 (1997)
• [文献書誌] Yoshi Nakanishi: "The expression of Platelet-derived Endopherirl growth factor/zhymidine phosphorylase associates with radiogenesis in epitherial orarian cancer." Int. J. Clin. oncol.2. 219-223 (1997)
• [文献書誌] Keigo Tokumo: "Differant angiogenic paohnaiyo in hamon cuiical oencecs." Gynecul. oncol.68. 38-44 (1998)
• [文献書誌] Akihiko Seki: "A class cauelctin hetmean c-aibB・2 gene anglilicatein and ocae progursion in andoutial sdenocarcinoma." Eur. J. Gynaec. Oncol.19・1. 90-92 (1998)
• [文献書誌] Keizo Tokumo: "CD44 exon V6 is not implicated is the progression and relastasis of end retrial cancer" Cancer Letters. 125. 221-225 (1998)
• [文献書誌] Yasuaki Kobayashi: "Preshare human popillona virus DNA in public lymph nodes on predict imexpected resonance of cerrical cancer in patients with histdegically negative lymph node." Clin. Cancer Res.4. 929-983 (1998)
• [文献書誌] 吉野内光夫: "IGF-1レセプター・アンチセンス法による子宮頚癌遺伝子治療の基礎的検討" 山陽放送学術文化財団リポート. 42. 39-44 (1998)
• [文献書誌] 吉野内光夫: "骨髄リンパ節でのHPV DNA検出による子宮頚癌微小転移の予知" 産婦の世界. 50・7. 461-468 (1998)
• [文献書誌] 吉野内光夫: "子宮頚癌術後再発の予知" 産婦人科治療. 77・4. 436-440 (1998)
• [文献書誌] Keizo Tokumo: "CD44 excn V6 comelates with allelar diffentiation but not with progessin and metastares of ceirical cancer" Eur. J. Cancer. 34・13. 2107-2111 (1998)