| 研究概要 |
生後1から2日目の新生仔ラットの下肢長骨を培養液(minimum essential medium alphamedium;Gibco BRL)中で細片化し、ピペットで撹拌して破骨細胞を遊離し、浮遊液をカバーグラスに散布した.顕微鏡下に3から4つの核を持つ細胞を全細胞電位固定法に使用した.破骨細胞であることはtartrate-resistant acid phosphatase(TRAP)で染色されることで確認した.外液を134 mM NaCl、6mM KCl、10mM glucose、0.5 mM MgCI_2、1.25mM CaCl_2、10mM HEPES(pH7.3;Trisにより調節)とし、ピペット内液を140 mM KCl、10mM EGTA,2mM ATP、10 mM HEPES(pH7.3;Trisにより調節)とした条件下で全細胞電位固定法で破骨細胞の電流を記録すると内向き整流性K電流が記録された.外液に1nM以上の濃度の17β-estradiolを投与するとこの内向き整流性K電流は17β-estradiolにより用量依存的に抑制された.このことから17β-estradiolは破骨細胞の内向き整流性K電流の抑制により膜を過分極させ、破骨細胞の骨吸収作用を抑制するものと考えられる.
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