| 研究課題/領域番号 |
09671822
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
眼科学
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| 研究機関 | 金沢医科大学 |
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研究代表者 |
西川 克三 金沢医科大学, 医学部, 教授 (10029960)
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| 研究分担者 |
福田 正道 金沢医科大学, 医学部, 助手 (70208966)
高橋 信夫 金沢医科大学, 総合医学研究所, 教授 (20006787)
竹内 郁登 金沢医科大学, 医学部, 講師 (70262623)
吉竹 佳の 金沢医科大学, 医学部, 講師 (00150764)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1998
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| キーワード | 緑内障 / 増殖因子 / 線維芽細胞 / 単クローン抗体 / 増殖抑制 / FGF |
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| 研究概要 |
緑内障の治療法の一つである濾過手術は有効な手段であるが、術後の穿孔創の閉鎖による再発が問題となっている。この閉鎖は主に線維芽細胞の増殖による瘢痕組織の形成が原因と考えられている。従って、この増殖機構を解明し、その制御手段を開発することが臨床上重要な課題である。この目的で、緑内障濾過手術時に得られたテノン嚢組織片から、ヒト線維芽細胞を初代培養し,この細胞を植えついだ細胞株を用いて以下の実験を行った。この培養線維芽細胞において、塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)が発現していることを、すでに作製している特異的単クローン抗体を用いたRIAや免疫細胞染色法によって明らかにした。同抗体による染色では主に細胞核が濃染され、多くの腫瘍細胞と同様に、bFGFの核移行が示された。上皮増殖因子(EGF)に対する同様の実験ではこの培養線維芽細胞におけるEGFの産生は認められなかった。同培養細胞の増殖は培地に添加したウシ胎児血清の濃度に依存した。さらに、培地に添加したbFGFやEGFはその増殖を促進した。培養した線維芽細胞から総RNAを抽出して、特異的なプライマーを用いてRT-PCR法によりbFGF、分泌性および細胞内在性FGF結合蛋白質の発現を調べた結果、いずれものmRNAが認められた。bFGFのmRNAの発現は、培地に添加したbFGFによってダウンレギュレートされた。この線維芽細胞によって産生されるbFGFの機能を明らかにするため、我々の開発したbFGFの中和単クローン抗体を用いて同細胞の生存に対する効果を検討した。同抗体を添加した培地中で少数の細胞を培養し、その後抗体を除去した増殖培地中で培養して形成されるコロニー数を計測したところ、抗体は濃度および時間依存的にコロニー数を減少させた。即ち、同細胞が産生するbFGFは生存に必要な因子と考えられる。
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