| 研究課題/領域番号 |
09671825
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
眼科学
|
|---|
| 研究機関 | 久留米大学 |
|---|
研究代表者 |
吉村 浩一 久留米大学, 医学部, 講師 (30240352)
|
|---|
| 研究分担者 |
渡邉 俊樹 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (30182934)
疋田 直文 久留米大学, 医学部, 助教授 (80173152)
望月 学 久留米大学, 医学部, 教授 (10010464)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1997 – 1998
|
| キーワード | HTLV-1 / ぶどう膜炎 / 前房水 / サイトカイン / 免疫抑制因子 / sFasL |
|---|
| 研究概要 |
本研究期間を通じて以下のような結果を得た。
(1) 房水によるサイトカイン産生抑制作用の解析:構成的にサイトカインを過剰発現するHTLV-1感染T細胞クローンおよびT細胞株(Sez)を標的細胞とした実験から、前房水がIL-6及びIFN-γに対して産生抑制作用を持つことを明らかにした。
(2) 免疫抑制因子の性状:前房水にの上記の抑制活性は、限外濾過法およびゲル濾過カラム(Superose 12HR)を用いた解析から、抑制因子は複数であり約30-80kD、10kD、5kD,3kD前後の少なくとも4つの因子からなることが明らかにした。
(3) 前房水中の抑制因子としての可溶性Fas ligand(sFasL):30-80kDの分画に含まれる抑制因子の実体が、前房水中に存在するsFasLであることを以下の実験結果から明らかにした。
1、 ELISA法を用いて房水中にsFasLが平均300pg/ml前後の濃度で存在することを示した。
2、 抗Fas抗体によるクロスリンクおよび我々が作成したHis-tagged sFasLにり、IFN-γの転写が抑制され、蛋白レベルでの発現も抑制される。
3、 抗sFasL抗体により抑制活性が中和される。
4、 sFasLによる抑制作用は、房水中に生理的に存在する濃度(数百pg/ml)あるいはそれ以下で有意な抑制が認められる。
(4) sFasLによるIFN-gプロモーター抑制機構の解析:
プロモーターの転写開始点から-183〜-206塩基のYY1結合配列とE-boxを含む約24塩基の配列がFasシグナルによる転写抑制に必要なcis-elementであることを明らかにした。Fasの細胞内領域に結合するアダプター蛋白質FADDおよびDaxxのうち、FasシグナルによるIFN-γプロモーターの抑制はDaxxを介していることをdominant negative体を用いた解析から明らかにした。
|
