| 研究概要 |
1、主要構成VFA(酪酸,プロピオン酸,イソ吉草酸)はいずれもマウス胸腺細胞,脾臓T細胞,ヒト末梢血リンパ球(PBMC)及びJurkat組胞に対しアポトーシスを誘導し、その強度は酪酸>プロビオン酸>イソ吉草酸の順であった。また細抱のアポトーシス感受性は胸腺細胞>Jurkat細胞>脾臓T細胞>PBMCの順に高く、PBMCはVFAのアポトーシス誘導能に対しやや抵抗性を示した。
2、酪酸誘導アポトーシスにおけるアポトーシス関連蛋白(bcl-2,Bax,Fas及びFasリガンド)の関与をWestem blotting解析したところ、bcl-2発現の低下が認められ更にbcl-2リン酸化体も消失していた。一方Bax,Fas及びFasリガンドの発現に変化は認められなかった。FACS解析においては酪酸添加によりbcl-2陽性細胞数は低下したもののFas陽性細胞の比率に変化は認められなかった。
3、RT-PCR並びにWestem blotting解析の結果から、酪酸によるp53遺伝子発現の増強は認められなかった。酪酸はp53遺伝子欠損マウスから調整した胸線細胞、脾臓T細胞及びB細胞に対し濃度依存的及び経時的にアポトーシスを誘導し、野生型マウスとの間に有為差は認められなかった。
4、細胞表層ホスファチジルセリン(PS)の表出をFACS解析したところ、酪酸添加によりPS表出か認められ、経時的にアポトーシス初期細胞及びアポトーシス後期細胞いずれをも増加させていた。
5、酪酸誘導アポトーシスにおけるCaspaseカスケードの関与を検討したところ、いずれの細胞においてもCaspase1及びCaspase8活性の増加は認められないものの、Caspase3及びCaspase6活性は酪酸添加により経時的な増加が認められた。
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