研究課題
基盤研究(C)
マボヤを用いて卵一精子相互作用の分子機構を総合的に探る一環として精子一卵結合に関わる卵黄膜上の糖鎖と精子表面のグルコシダーゼに着目し、研究を行った。マボヤ卵黄膜から糖ペプチドを得た後、ヒドラジン分解を行い遊離した糖鎖を分子サイズによりFr.lとFr.llにわけたところ、精子結合リガンドとしての活性はFr.lに回収された。Fr.lはさらに中性糖鎖と酸性度の異なる2種類の酸性糖鎖に分画でき、この活性は酸性度の強い酸性糖鎖に強い活性が見られた。この活性を示す酸性糖鎖は硫酸基がついており、脱硫酸によりこの活性は失われた。また、この主要酸性糖鎖は共通構造単位を持ち、-4Xyl1-3GalNAc1-及び-4Xyl1-3GalNAc1-(4SO_4)-という構造を含むことが明らかとなった。一方、卵一精子結合の精子側の因子としてはα-L-フコシダーゼが関わることがわかっている。そこで、精子α-L-フコシダーゼcDNAの単離を行い、全長配列を決定した。シグナル配列を含む466残基のアミノ酸配列をコードしていた。このcDNAに対する抗体は52kDaの精子タンパク質と反応し、受精の系にこの抗体を加えることにより受精が阻害することから、このcDNAが受精に深く関わることが示唆された。
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