脳特異的遺伝子導入方による発生後期過程の脳機能形成でのミクログリアの役割の解析

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09680774
• 研究機関: 藤田保健衛生大学
• 研究代表者: 澤田 誠 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所, 助教授 (10187297)
• キーワード: ミクログリア / 遺伝子導入 / 脳特異的 / 脳の発生 / 機能形成

研究概要

第3年次として本年度は以下のような結果を得た。
1.我々が樹立したミクログリア株細胞に外来性遺伝子を導入し、独自に開発した脳特異的バイオターゲッティング法を用いることによって、目的遺伝子を脳に特異的に発現させることに成功した。また、導入したミクログリアは脳に生着し、数ヶ月にわたって生存することがわかった。
2.一過性前脳虚血モデルにおいて脳特異的バイオターゲッティング法でミクログリアを虚血性神経細胞死巣に導入してinvivoで直接ミクログリアの老化促進ストレス応答を検討するシステムを開発した。この系でみられる遅延性神経細胞死は活性化ミクログリアを抹消から導入しておくことによって抑制されることがわかった。
3.GFPトランスジェニックマウスの骨髄細胞を正常同型マウスに移植し骨髄キメラを作製し、GFP陽性細胞をレシピエントマウス体内において追跡できる系を確立した。レシピエントの脳と末梢臓器において、GFP陽性細胞が移行していることが確認でき、それらのほとんどはクラスターを形成していた。脳におけるクラスターは、末梢臓器に比較して未分化であり通常の単球では発現しえない抗原を発現していることを示した。したがってミクログリアの発生的起源は、血液を循環している単球に由来するのではなく未分化な骨髄前駆細胞が脳実質中に移行し血球系の細胞とは独立した分化をとげたものである可能性を示唆できた。

研究成果

• [文献書誌] Sawada, M., et al.: "IL-10 inhibits both production of cytokines and expression of cytokine receptors in microglia"J Neurochem.. 72. 1466-1471 (1999)
• [文献書誌] Ono, K., et al.: "Migration of exogenous immature hematopoietic cells into adult mouse brain parenchyma under GFP-expressing bone marrow chimera"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 262. 610-614 (1999)
• [文献書誌] Suzumura, A., et al: "Ibudilast suppresses TNF alpha production by glial cells functioning mainly as type III phosphodies Terase inhibitor in CNS"Brain Res.. 837. 203-212 (1999)
• [文献書誌] Inoue, H, Sasada, M, et al.: "Serial analysis of gene expression in a microglial cell line"Glia.. 28. 265-271 (1999)
• [文献書誌] Suzumura, A., Sawada, M.: "Effects of vesnarmone on cytokine production and activation of murine microglia"Life Sciences. 64. 1197-1203 (1999)
• [文献書誌] Imai, F., Sawada, M., et al: "Exogenous microglia enter the brain and migrate into ischaemic hippocampal lesions"Neurosci. Lett.. 272. 127-130 (1999)