1998 年度実績報告書

複数の基質取り込みサイトを持つ超分子型反応場の設計と活性発現

研究課題

研究課題/領域番号	09750882
研究機関	広島県立大学
研究代表者	一二三恵美広島県立大学, 生物資源学部, 助手 (90254606)
キーワード	超分子 / 抗体 / ポルフィリン / エイズ
研究概要	本年度に取り組む課題は交付申請書の研究実施計画にあるように1、分子モジュールA・Bの連結、2、超分子の構築、3、活性発現の反応条件の検討、である。 1、分子モジュールA・Bの連結のためにはどのリンカー配列が良いか決める必要があり、コンピューターを用いて検討した。分子モジュールA・Bの両者が近傍に来ることがリンカーの必要条件である。そこで、-Pro-Pro-Pro-,-Pro-His-His-,-Gly-Pro-などのいくつかの配列をインプットし分子力学場計算をしたところ-Gly-Pro-のみが目的の立体構造を取った。そこで以下の実験はこの配列を採用した。 2、超分子前駆体として分子モジュールA・Bを一Gly-Pro-で架橋した36merのポリペプチドの合成を行った。分子モジュールA・Bを別々に合成して-Gly-Pro-で架橋する方法ではなく、ペプチド自動合成機でC末端から1段でN末端まで合成した。精製後MSで確認を行った。次に、この超分子前駆体を使って抗原であるエイズウイルスgp41ペプチドおよびポリフィリンの取り込みを各種分光学的手法を用いて検討した。CDスペクトルから、gp41ペプチドは超分子前駆体への取り込みがゆっくりしていて、しかも取り込まれた後も、ゆっくりしたコンフォーメーション変化を起こすと推定された。一方ポルフィリンはすぐに取り込まれ、その後ゆっくりと超分子前駆体のコンフォーメーション変化が起こること思われた。この結果はUVスペクトルおよび表面プラズモン共鳴法の結果からも支持された。 3、超分子前駆体と両抗原とを同一の反応系に加え、各種実験条件を変化させてgp41ペプチドの消失をHPLCで追跡した。ポルフィリンに金属イオンとしてMnを導入したものを用い、反応温度50〜60ﾟCで数十倍の酵素活性を発現できた。この時、Mnを含まないポルフィリンでは全く活性を示さなかった。

研究成果

(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] T.Uda,E.Hifumi,Y.Okamoto,Z.Yan,and M.Ishimaru: "Destruction of gp41 of HIV-1 envelope by its catalytic antibody light chain." Clinical Science. 2. 429-433 (1998)
[文献書誌] E.Hifumi,H.Sakata,M.Nango,T.Uda: "Design of artificial molecular catalyst showing peptidase activity to the conserved sequence of HIV-1 envelope gp41." J.Mol.Catal.in press. (1999)
[文献書誌] Y.Ikeda,R.Fujii,K.Ogino,K.Fukushima,E.Hifumi and T.Uda: "Immunological features and inhibitive effects on enzymatic activity of monoclonal antibodies against Helicobacter pylori Urease." J.Ferment.Bioeng.86. 271-276 (1998)
[文献書誌] E.Hifumi,F.Morihara,M.Ishimaru,K.Morikawa,K.Shimizu,and T.Uda: "Immunochemical features of complementarity determining region(CDR)peptide in anti hemin monoclonal antibody." J.Peptide Sci.4 in press. (1998)
[文献書誌] 一二三恵美、石丸正則、宇田泰三、南後守: "キメラ型ミニ抗体によるエイズ抗原及びポルフィリンの同時取り込み" 平成10年度日本生物工学会予稿集. 279 (1998)
[文献書誌] 一二三恵美、岡本洋史子、宇田泰三: "スーパー抗体酵素(II) エイズウイルスHIV)-1型の外膜タンパクgp41分子を完全に破壊する抗体酵素" 平成10年度日本生物工学会予稿集. 129 (1998)
[文献書誌] 宇田泰三、森原史子、一二三恵美: "複数のミニ抗体よりなる新機能分子" 第3回バイオテクノロジー部会シンポジウム講演要旨集. 14 (1998)

1998 年度 実績報告書

複数の基質取り込みサイトを持つ超分子型反応場の設計と活性発現

研究代表者

一二三 恵美 広島県立大学, 生物資源学部, 助手 (90254606)

研究成果

[文献書誌] T.Uda,E.Hifumi,Y.Okamoto,Z.Yan,and M.Ishimaru: "Destruction of gp41 of HIV-1 envelope by its catalytic antibody light chain." Clinical Science. 2. 429-433 (1998)

[文献書誌] E.Hifumi,H.Sakata,M.Nango,T.Uda: "Design of artificial molecular catalyst showing peptidase activity to the conserved sequence of HIV-1 envelope gp41." J.Mol.Catal.in press. (1999)

[文献書誌] Y.Ikeda,R.Fujii,K.Ogino,K.Fukushima,E.Hifumi and T.Uda: "Immunological features and inhibitive effects on enzymatic activity of monoclonal antibodies against Helicobacter pylori Urease." J.Ferment.Bioeng.86. 271-276 (1998)

[文献書誌] E.Hifumi,F.Morihara,M.Ishimaru,K.Morikawa,K.Shimizu,and T.Uda: "Immunochemical features of complementarity determining region(CDR)peptide in anti hemin monoclonal antibody." J.Peptide Sci.4 in press. (1998)

[文献書誌] 一二三恵美、石丸正則、宇田泰三、南後守: "キメラ型ミニ抗体によるエイズ抗原及びポルフィリンの同時取り込み" 平成10年度日本生物工学会予稿集. 279 (1998)

[文献書誌] 一二三恵美、岡本洋史子、宇田泰三: "スーパー抗体酵素(II) エイズウイルスHIV)-1型の外膜タンパクgp41分子を完全に破壊する抗体酵素" 平成10年度日本生物工学会予稿集. 129 (1998)

[文献書誌] 宇田泰三、森原史子、一二三恵美: "複数のミニ抗体よりなる新機能分子" 第3回バイオテクノロジー部会シンポジウム講演要旨集. 14 (1998)

1998 年度実績報告書

一二三恵美広島県立大学, 生物資源学部, 助手 (90254606)