魚類精子形成関連遺伝子群の発現機構の解析とその作用の検索

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09760169
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 三浦 猛 北海道大学, 水産学部, 助手 (00261339)
• キーワード: 精子形成 / 減数分裂 / アクチビンB / PCNA / ヒストンH1 / ZP2 / ZP3 / カテプシンL

研究概要

cDNAサブトラクション法並びにディファレンシャルディスプレー法により得られたウナギの精子形成関連遺伝子群(eel spermatogenesis related substance:eSRS)の作用機構を解明する第一段階として、各因子のmRNAの発現時期及び発現部位をノーザン解析並びにin situハイブリダイゼーションにより調べた。精子形成開始時に精巣での発現が消失するeSRS3(ZP2様物質),4(ZP3様物質),5(カテプシンL様物質)は、それぞれ精子形成開始前の精原細胞にのみ発現が認められた。このことより、これら3つの因子は、養殖ウナギ精子形成の特徴である精原細胞増殖前の休止状態の維持に何らかの関係があるものと予想された。精子形成開始時に発現が誘導されるeSRS1(ウナギアクチビンB)は、ヒト絨毛性生殖腺刺激ホルモン(HCG)投与により精子形成開始の引き金が引かれた後24時間以内に生殖細胞を取り巻く体細胞:セルトリ細胞に強い発現が認められるようになった。この発現は、HCG投与後9日目からその発現は減少に転じ、精巣に精母細胞が出現する12日目からはその発現はほとんど認められなくなった。この発現パターンよりeSRS1は、精原細胞の増殖に何らかの関係があるものと予想された。HCG投与後3日目以降精巣での発現が認められるeSRS9(PCNA様物質)の発現は、分裂回数6回以下の増殖中の精原細胞のみに認められた。HCG投与後9日目以降に精巣での発現が認められるeSRS11(ヒストンH1様物質)は、比較的分裂回数の多い精原細胞と、精母細胞にのみ発現しており、精細胞および精子には発現が認められなかった。この結果よりeSRS9およびeSRS11は、減数分裂の制御に関与する可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] T.Miura, S.Kawamura, C.Miura, K.Yamauchi.: "Impaired spermalogenesis in the Japanese eel,Anguilla japonica Possibility for the existence of factors that regulate entry of germ cells into meiosis." Development,Growth and Differentiation. 39. 685-691 (1997)
• [文献書誌] J.D.Tan-Fermin, T.Miura, H.Ueda, S.Adachi, K.Yamaguchi.: "Testicular histology and serum steroid hormone profiles in hatchery-bred catfish clarias macrocephalus (Gunther) during an annual reproductive cycle." Fisheries Science. 63. 681-686 (1997)
• [文献書誌] H.Chiba, T.Miura, M.Nakamura, K.Yamauchi.: "Differentiation and development of I eydig cell,and induction of spermatogenesis during testicular differentiation in the Japanese eel,Anguilla Japonica." Fish Physiology and Biochemistry. 16. 187-195 (1997)
• [文献書誌] W.Ge, T.Miura, H.Kobayashi, R.E.Peter, Y.Nagahama.: "Clonong of cDNA for goldfish activin βB subunit,and the expression of its mRNA in gonadal and non-gonadal tissues." Journal of Molecular Endarinology. 19. 37-45 (1997)