| 研究概要 |
本研究の目的は,加齢が肺内DCの分布やそのphenotype,抗原提示能に及ぼす影響を検討し,加齢に伴う肺局所の免疫応答の変化を抗原提示細胞に焦点を当てて解明することである.現在までに以下のような結果が得られた.
1. 加齢による肺内DCの分布の変化:
若齢BNラット(7-9w)と老齢ラット(100-130w)の肺組織を用いて抗MHC class II抗体(OX6)および抗DC抗体(OX62)による免疫組織染色を行い,DCの解剖学的な分布や単位面積当たりのDC数を比較検討した.老齢ラットでは単位面積当たりのOX6陽性DCが 若干減少する傾向がみられたが,OX62陽性細胞数に差はなかった.
2. 肺由来のdendritic cell(DC)のPhenotypeに対する加齢の影響:
ラット肺をcollagenase,DNaseで処理してsingle cellとし,bovine serum albuminを用いた濃度勾配によってlow density fraction(LD)を得,続いてLDを抗MHC class II抗体(OX6)とinubationし,抗マウスIgG抗体が結合したmagnetic beadsを用い,magnetic cell sorter(MACS)によるpositive selectionを行うことによって90%以上のpurity でDCを肺から単離することに成功した.単離したDCを用いた検討では,高齢ラットのDCのは若齢ラットに比較し,接着因子の発現が弱く,allogeneic mixed lymphocyte reactionにおける抗原提示能も弱い傾向を認めた.
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