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Maillard反応後期生成物(以下、AGEsと略)の人生検材料における分布を、免疫電顕法を用いて検討した。一次抗体として、抗AGEs抗体(6D12)、抗e1astin抗体を用い、二次抗体としては、15-nm金コロイド標識抗マウスIgG抗体を用いた。なお、二重染色では、二次抗体として、15-nmおよび6-nmの金コロイド標識抗体を用いた。生検材料は、一4°Cで固定、LR White resinに包埋した。
高齢者露光部(顔面)における検討では、AGEsは電顕的にactinic elastosisに特徴的とされる、elastotic degenerated fiberに一致して分布しており、elastinはelasttic fiberおよびelastotic degenerated fiberの低電子密度の部分に分布していた。二重免疫電顕法による、elastotic degenerated fiberのfibrousおよびamorphous formでの比較では、前者においては、高電子密度(日光老化に伴って増加してくる)部分にはAGEsが、低電子密度の部分にはelastinが分布していた。後者では、AGEsが主体で分布していた。ただし、高電子密度の部分にAGEsが分布している点は共通であった。Grenz zoneでは、AGEs、elastinともに明らかな分布は認められなかったが、actinic elastosis領域での線維芽細胞では、AGEsの散在的な分布を認めた。また、表皮レベルでもAGEsの軽度の分布を認めた。
これまでは、AGEsの細胞内での存在は確認されていなかったが、最近、細胞での存在の可能性も示唆されてきており、今回使用した6D12以外の抗体を用いて、さらに検討する予定である。また、現在、日光老化のモデルマウスを作成中であり、日光老化の過程を検討する予定である。
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