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1、 男性型脱毛部の毛乳頭細胞でのnexin 1の発現に及ぼす男性ホルモンの影響:男性型脱毛部の毛乳頭細胞をdihydrotestosterone(DHT)存在下で24時間培養し、nexin 1の発現量の変化をNorthern blot法で解析した。9年度に半定量RT-PCR法で得られた結果と同様、DHT処理によってnexin 1の発現量は減少した。
2、 半定量RT-PCR法によるnexin 1の局在の検討:男性型脱毛部より毛包を単離し5つのブロック(毛乳頭、下部結合織性毛包、下部上皮系組織(毛母細胞)、上部上皮系組織(内・外毛根鞘)、上部結合織性毛包)に分割し、各々のブロックよりRNAを抽出しnexin 1についてRT-PCRを行った。nexin 1は毛乳頭とそれに続く結合織性毛包の下部で発現が認められた。
3、 In situ hybridization(ISH)によるnexin 1の局在の検討:digoxigenin-labeled oligonucleotide probeおよびT-T dimerized oligonucleotide probeを用いたISH法を確立中である。
4、 免疫組織化学によるnexin 1の局在の検討:ヒトnexin-1の合成ペプチドをウサギに免疫し、抗体を作製した。今後これを用いてヒト毛包でのnexin 1の局在を検討する。
5、 今年度の研究によってヒトの毛包ではnexin 1は毛乳頭に加えて、結合織性毛包の下部においても発現していることが示唆された。結合織性毛包は毛乳頭細胞の供給源となるため興味深い。今後もnexin 1の局在について検討を続けたい。
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