骨髄腫細胞に発現するアポトーシス関連リン酸化蛋白質のクローニング

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09770824
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 畑 裕之 熊本大学, 医学部付属病院, 助手 (70271129)
• キーワード: 多発性骨髄腫 / アポトーシス / Bcl-2 / Bcl-X / Bax

研究概要

本研究の目的は、骨髄腫細胞株に見られるspontaneous apoptosisの機序とその制御機構を明らかにすることであった。CHX作用後の細胞内アポトーシス関連物質、特にBcl-2familyの発現を検討したところ、Bcl-2またはBcl-XLのアポトーシス抑制物質とBcl-XSまたはBAXのアポトーシス促進物質のバランスの不均衡がspontaneous apoptosis、CHX-apoptosisを制御していることを見出した。すなわち、Bcl-2,Bcl-XLの発現が強く、Bax,Bcl-Xsの発現が弱い細胞株はアポトーシスをおこしにくい。さらに、CHXによりBaxの発現が増強することも見出した。CHXによるBaxの発現増強は今まで報告がなく、BaxがいわゆるCHXによるsuperinductionといわれるparadoxicalな発現制御を受けるタンパク質の一つであることが示された。そこで、この関係が実際に患者サンプルでも観察されるかどうかを検討した。その結果、Bcl-2familyの発現は症例ごとにさまざまに制御されていることが判明した。すなわち、spontaneous apoptosisをきたしやすい、いわゆる劇症型骨髄腫といわれる症例では、細胞株と同じくBcl-2(-)、Bax(+)のパターンを示した。病像との関連では、病期が進むとBcl-XLの発現が増強する傾向が見られ、また、髄外浸潤例にもBc1-XLの発現が多く見られた。化学療法の前後では、Bcl-2、Bcl-XLの発現は変化せず、薬剤耐性化に直接関わる証拠は得られなかった。以上より、骨髄腫細胞のspontaneous apoptosisにはBcl-2familyの発現が深く関わることが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Harada N,他8名: "Expression of Bcl-2 family of proteins in fresh myeloma cells." Leukemia. 12. 1817-1820 (1998)
• [文献書誌] Sonoki T,他11名: "Amplification and overexpression of the PRAD1/cyclin D1 gene in a multiple myeloma cell line." International Journal of Hematology. 68. 459-461 (1998)
• [文献書誌] Ohtsuki T,他8名: "In vitro excess ammonia production in human myeloma cell lines." Leukemia. 12. 1149-1158 (1998)
• [文献書誌] Kuribayashi N,他8名: "Establishment of a monoclonal antibody to human myeloma cell:relation to chemotherapy and extramedullar infiltration." Medical Oncology. in press. (1999)
• [文献書誌] Sonoki T,他9名: "Expression of PRAD1/cyclin D1 in plasma cell malignancy : incidence and prognostic aspects." British Jurnal of Haematology.
• [文献書誌] in press. (1999)
• [文献書誌] Sonoki T,他11名: "Detection of inducible nitric oxide synthase(iNOS)mRNA by RT-PC in ATL patients and HTLV-I infected cell lines:Clinical features and apoptosis by NOS inhibitor." Leukemia. in press. (1999)