| 研究概要 |
研究課題名:習慣流産患者におるTAP遺伝子の多型性の基礎的解析
研究目的:習慣流産の拒絶反応の標的抗原を明らかにするために,胎児由来の胎盤に発現されているHLA-G抗原およびHLA-G抗原に結合するペプチドを規定するTAP(Transporter Associated with antigen Processing)遺伝子の多型性を習慣流産患者について検討した。
研究内容:1.対象:当院で習慣流産のため夫リンパ球による免疫療法を施行した49組,98例を対象とした。
2.検討内容:TAP遺伝子をPCR-RFLP法およびSSCP-PCR法により多型性および夫婦間の遺伝子共有率を解析した。
研究方法:1.凍結顆粒球よりPhenol-Chloroform法により染色体DNAを抽出した。
2.TAP1,TAP2遺伝子の多型部位をPCR法により増幅した。
3.制限酵素(Sau3A,AccI,AccII,NspI,BfaI,RsaI)により切断し,TAP1A-1D,TAP2A-2Hを分類した。さらに、TAP2-3およびTAP2-2に対してSSCP法によりその多型を解析した。
成績:1.TAP遺伝子頻度
1)TAP1遺伝子頻度:TAP1A86.2%、1B11.2%1C0.5%,1D2.0%(A:Ile-Asp,B:Val-Gly,C:Val-Asp,D:Ile-Gly)
2)TAP2遺伝子頻度:TAP2A 52.3%,2B 20.9%,2C 14.7%,2D 2.8%,2E 4.1%,2E 4.1%,2F 0%,2G 1.5%,2H 3.4%,(A:Val-Ala-Thr-Stop,B:Val-Ala-Ala-Gln,C:Ile-Ala-Thr-Stop,D:Ile-Thr-Thr-Stop,E:Val-Thr-Thr-Stop,F:Ile-Thr-Ala-Gln,G:Val-Ala-Gln,H:Ile-Ala-Ala-Gln)
2.夫婦間のTAP遺伝子の共有頻度
1)TAP1遺伝子の共有頻度:共有なし:0%,共有数1:46.7%,2:53.3%
2)TAP2遺伝子の共有頻度:共有なし:32.1%,共有数1:39.7%,2:28.2%
考察:今回の検討から,反復流産夫婦におけるTAP遺伝子頻度は諸家の健常人のものと同等の頻度であった。しかし,健常夫婦間におけるTAP遺伝子の共有率や反復流産夫婦とのTAP遺伝子の頻度差やHLA-G抗原の多型性に関しては今後検討を要す。
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