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既知の転写制御因子の標的となる遺伝子を単離するための工夫として、転写を積極的に抑制する機能をもついわゆるactive repressor domainとのキメラ転写因子を作製してその性状を調べた。転写活性化因子でもある癌遺伝子Mycに転写抑制因子Mxilのrepressor domain(SID : Sin3-interaction domain)を結合したキメラ蛋白質を構築したところ、Myc結合配列を持つ人工的なreporter geneの発現を抑制することが確認された。しかしながら、Mycの転写活性化能とその重要な生物活性のひとつである細胞のtransformation能とのあいだに明確な相関関係を認めることが出来なかったため、対象を癌遺伝子産物/転写活性化因子Mafに変更して同様の実験を行った。MxilのSIDとMafとのキメラ蛋白質は、これも期待されたように強い転写抑制能を示した。さらに、非常に強い転写活性化能を持つVP16 activation domainをMafに結合したキメラなど一連の組み換え蛋白質を作製し、これらの転写活性化能とchicken emoryo fioroblastにおけるtransformation能とを調べたところ、Mafの転写活性化能はtransformationにとって必須であり、かつMaf自身の転写活性化domainはVP16などのヘテロな転写活性化domainで置換可能であることがわかった。すなわち、Mafについてはその転写活性化能と生物学的機能とのあいだに明確な相関関係があり、Mafは標的遺伝子の転写を活性化することでその機能を発揮するであろうことが推測された。したがって、本研究の目的である標的遺伝子の単離を試みるのに適していると考えられ、次年度以降これを試みる。
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