特異的シナプス結合形成機構の分子生物学的解析

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09780706
• 研究機関: 福井医科大学
• 研究代表者: 佐藤 真 福井医科大学, 医学部, 教授 (10222019)
• キーワード: 皮質橋路 / トポグラフィー / ラット / ディフェレンシャル・ディスプレイ / クローニング / 橋核

研究概要

本研究は、大脳皮質から橋にのびるいわゆる皮質橋路に着目し(皮質橋路は大脳皮質と橋核の間にトポグラフィカルな結合があり、ラットの例では大脳皮質前頭葉から橋核外側部に、視覚野から橋核内側部に投射することが報告されている)その回路形成のメカニズムを探る目的で開始した。その結果、我々は、differential display法を用い、橋核外側部に強く発現する分子の遺伝子断片ならびに内側部に強く発現する遺伝子断片を得た。そこで、本遺伝子群がトポグラフィカルな結合に関与する可能性を考え、まずこれら遺伝子群の全長をクローニングし、その機能を解析することを計画した。
これらの遺伝子のうち、一方は全長に近い遺伝子を得ることができた(#1)が、もう一方(#2)はいまだ全長を得ることができておらず、現在でも全長取得に向け実験を行っている。#1に関しては、その一部分に対応するペプチドを合成し、抗ペプチドポリクローナル抗体の作成を試みたが、残念ながら、得られた抗体群の特異性は低く、免疫組織化学的に使用に耐えうるちのは現在でも得られていない。今後、#1に関し、さらに抗体の作成、得られたクローンのシークエンスの再チェック、発現部位の再確認を行うとともに、#2に関しては全長の取得を目指し、クローニングの作業を続ける予定である。ただ、#2に関しては発現が、脳神経系内では発生期の橋に比較的限定されており、効率の良いcDNAライブラリーが得られておらず、その点が実験の障害となっている。今後、神経系以外における発現を検討し、効率のよいライブラリーの構築を行い実験を進める予定である。

研究成果

• [文献書誌] Yoneda, T et al.: "Ideutification of a novel adenylate kinase system in the brain : cloning of the 4th adeuylate kinase" Mol Brain Res.62. 187-195 (1998)
• [文献書誌] Nakamura, T. ,et al.: "Cloning and heterogenous in vivo expression of Tat binding protein-1 (TBP-1) in the mouse." Biochim, Biophys. Acta. 1399. 93-100 (1998)
• [文献書誌] Nakamura, T, et al.: "Distribution of mRNA emoding Tat binding protein-1 (TBP-1), a component of 26s proteasome in the rat brain." Mol Brain Res. 53. 321-327 (1998)
• [文献書誌] Nagano, T. et al.: "Differentially expressed olfactomedin-related glycoproteins (Pancortins) in the brain." Mol Brain Res.53. 13-23 (1998)
• [文献書誌] Tanaka, T et al.: "Moleculqr cloning and characterization of a novel TBP-1 interacting protein (TBPIP)" Biochem. Biophys. Res.Commun.239. 176-181 (1997)
• [文献書誌] Komori, T et al.: "Targeted disruption of cbfa1 results in a complete lack of bone formation owing to maturation arrest of osteoblasts." Cell. 89. 755-764 (1997)