老化に伴う神経機能衰退過程における神経接着分子の役割

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09835014
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: (財)東京都老人総合研究所
• 研究代表者: 渡辺 和忠 (財)東京都老人総合研究所, 実験生物学部門, 室長 (70114717)
• 研究分担者: 細矢 博子 (財)東京都老人総合研究所, 細胞認識部門, 助手 (00158841) ; 小林 悟 (財)東京都老人総合研究所, 細胞認識部門, 研究員 (20100117)
• キーワード: コンタクチン / 免疫グロブリン・スーパーファミリー / 発現変化 / 脳内局在

研究概要

コンタクチンは免疫グロブリン・スーパーファミリーに属する神経接着分子である。この分子は胎児期にはほとんど認められず、出生後2週から3週頃に非常に強く発現する。コンタクチンは進化的に類似したTAG-1、BIG-1、BIG-2とサブグループを形成しており、互いにアミノ酸配列で約40%〜60%の類似度がある。これら全ての分子は神経系に特異的に発現している。私達は、このサブグループに属する新規の接着分子NB-2とNB-3を見いだした。そこで、今年度は、NB-2とNB-3の発生から老化に至るまでの発現変化を明らかにするために、ノーザン・ブロット法in situハイブリダイゼーション法およびウエスタン・ブロット法を用いて検討した。その結果、NB-2、NB-3ともにノーザン・ブロット法でmRNAの発現を調べたところ、大脳、小脳でともに胎児期では非常に少ないが、出生後6日付近で非常に強く発現する。その後、減少してゆくが、老化脳でも弱いながら発現が認められた。また、生後7日目のNB-2、NB-3のmRNAの脳内での局在をin situ hybridizationにより調べたところ、NB-3のmRNAは下丘と小脳での発現が非常に強く、大脳皮質、視床などでも発現が見られた。一方、NB-2のmRNAは上オリーブ核と下丘での発現が極めて強く、その他の部位では大脳皮質、視床、小脳での発現が認められた。更に、蛋白質レベルでの発現を明らかにする目的で、NB-2、NB-3、それぞれ対する特異抗体を作製した。この抗体を用いてウエスタン・ブロットを行い、発生段階での発現を調べたところ、mRNAの結果と同様に生後6日ほどで発現量が非常に多く、21日くらいまで強いバンドが検出された。成体になった後も弱いながらバンドが検出され、成体でも機能しているものと考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Kamei,Y.: "cDNA cloning and chromoscinal localization of neural aclhesion mclecule,NB-3,in human" J.Neurosci,Res.(in press). (1998)
• [文献書誌] Shimazaki,K.: "Age-related decline of F3/Contactin in rat hippocampus." Neurosci,Lett.(in press). (1998)
• [文献書誌] Takeuchi,K.: "Functional correlation between neural cell acthesion molecule TAG-1 and proteoglycans I.Cell biological study." Neurosci.Res.suppl.21. S119 (1997)
• [文献書誌] Watanabe,K.: "Isolation and expression of novel neural aclhesian molecules in the Contactin/F3 subgroup of the immunoglobulin superfamily" Neurosci.Res.suppl.21. S126 (1997)
• [文献書誌] Watanabe,K.: "Novel neural adhesion mclecules,NB-2 and NB-3,in the Contactin/F3 subgroup of the immunoglobulim superfamily" 27th Annual Meeting of Society for Neuroscience Abste. 22. 1970 (1997)
• [文献書誌] Kamei,Y.: "cDNA cloning and chromosomal localizaflon of the novel neural adhesion molecule,NB-3,in the human" 27th Annual Meeting of Society for Neuroscience Abstr.22. 1970 (1997)