| 研究概要 |
生物は一般に環境の温度変化に適応する能力をもっている。哺乳類細胞において、熱ショックに対する応答は研究されているが、低温ストレス応答についてはほとんど報告がない。しかし、下等生物では低温ショック蛋白等が報告されており、哺乳類にも類似の応答機構が存在する可能性がある。そこで哺乳類細胞で低温(32℃)で誘導される遺伝子を、分子生物学的方法でできるだけたくさん同定することを試みた。また脳で恒常的に発現の見られるCIRPについては、その機能を解析した。
1.ヒト血管内皮細胞株を37℃と32℃で培養する。それぞれからRNAを抽出して、プローブとし、DNAチップにより約10,000個の遺伝子発現を比較した。32℃で発現の冗進している遺伝子について解析中である。
2.既報のごとくcDNAサブトラクション法で、32℃特異的に脳低体温療法モデルラットで発現している遺伝子cDNAをクローニング中である。
3.マウスrbm3のcDNAをクローニングした。32度で発現が誘導される低温ショック蛋白であった。精巣のセルトリ細胞では恒常的に発現していて、実験的停留精巣では発現が減少した。
4.低温ショック蛋白cirp,rbm3その他遺伝子を強制発現させるために、レトロウイルスに組み込んだ。今後、細胞株に発現させて機能を解析する予定である。
5.cirpは脳ではでは恒常的に発現しているが発現に日内変動があり、概日リズムに関係している可能性が示唆された。また、低温で発現誘導がかかる機序として、遺伝子のcold responsive elementを同定した。
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