1999 年度実績報告書

内向き整流K^+チャネル遺伝子導入による頻拍性不整脈治療(成熟動物心筋細胞を用いた基礎研究)

研究課題

研究課題/領域番号	09877011
研究機関	大分医科大学
研究代表者	清末達人大分医科大学, 医学部, 助教授 (90128348)
キーワード	内向き整流K^+チャネル / ラット培養心筋細胞 / IRK1(Kir 2.1) / 遺伝子導入 / パッチクランプ法 / 頻拍性不整脈
研究概要	本研究では、頻拍性不整脈における新たな治療法を開発することをめざし、心筋細胞に外来のK^+チャネル遺伝子を導入する試みを行ってきた。これまでにアフリカツメガエル卵母細胞や、哺乳動物培養細胞株(CHO細胞、COS細胞)へIRK1チャネル遺伝子を導入し、単一チャネル電流および全細胞電流を記録して、単一チャネルコンダクタンスや、平均開時間、閉時間、Ba^<2+>感受性などを調べ、IRK1チャネルの発現を確認した。本年度は、成熟心筋細胞への遺伝子導入への第一歩として、ラットの異所心移植モデル(Ono-Lindseyモデル)を作成し、電気穿孔法による遺伝子ベクター導入の試みを行った。このモデルは、ドナー心の大動脈と肺動脈をレシピエントの下大動脈と下大静脈に、それぞれ吻合させるものである。移植された心臓はレシピエントの血液循環を担う必要がないので、電気穿孔法を用いた遺伝子導入手技に伴う侵襲に十分耐えることができる。K^+チャネル遺伝子の導入に先だち、遺伝子発現のレポーター分子GFP(Green Fluorescent Protein)をコードするベクターの導入実験を行った。その結果、広範な心筋細胞が蛍光を発するようになり、電気穿孔法による遺伝子導入が可能であるという示唆が得られた。その後、実際にIRK1の遺伝子導入実験を続けているが、現段階では明らかなチャネル発現は確認されていない。今後とも引き続き、最適な手技の開発をめざして検討を進める予定である。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] 尾崎任明: "Effect of bepridil 0n intracellular calcium concentration and contraction in cultured rat ventricular myocytes."Journal of Cardiovascular Pharmacology. 33. 492-499 (1999)
[文献書誌] 安部隆子: "Inhibition of Na^+-K^+ pump alleyiates the shortening of action potential duration casued by metabolic inhibition via blockade of K_<ATP> channels in coronary perfused ventricular mucscle of guinea pigs."Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 31. 533-542 (1999)
[文献書誌] 松井一哲: "Effects of pimobendan on the L-type Ca^<2+> current and developed tention in guinea-pig ventircular myocytes and papillary muscle:Comparison with IBMX,milrinone and cilostazol."Cardiovascular Drugs and Therapy. 13. 105-113 (1999)
[文献書誌] 清末達人: "糖尿病ラットにおける心筋イオンチャネル異常"心臓. 31(3). 183-188 (1999)
[文献書誌] 清末達人: "Altered expression of cardiac K^+ channel genes during sub-acute and healing phases of myocardial infarctiopn."Cardiovascular Research. 44. 13-16 (1999)
[文献書誌] 王金城: "Bepridil differentially inhibits two delayed rectifier K^+ currents,I_<Kr> and I_<Ks'> in guinea-pig ventricular myocytes."Britsh Journal of Pharmacology. 128. 1733-1738 (1999)
[文献書誌] 清末達人: "Practical Seminar 不整脈"日本医事新報社(印刷中).

1999 年度 実績報告書

内向き整流K^+チャネル遺伝子導入による頻拍性不整脈治療(成熟動物心筋細胞を用いた基礎研究)

研究代表者

清末 達人 大分医科大学, 医学部, 助教授 (90128348)

研究成果

[文献書誌] 尾崎 任明: "Effect of bepridil 0n intracellular calcium concentration and contraction in cultured rat ventricular myocytes."Journal of Cardiovascular Pharmacology. 33. 492-499 (1999)

[文献書誌] 安部 隆子: "Inhibition of Na^+-K^+ pump alleyiates the shortening of action potential duration casued by metabolic inhibition via blockade of K_<ATP> channels in coronary perfused ventricular mucscle of guinea pigs."Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 31. 533-542 (1999)

[文献書誌] 松井 一哲: "Effects of pimobendan on the L-type Ca^<2+> current and developed tention in guinea-pig ventircular myocytes and papillary muscle:Comparison with IBMX,milrinone and cilostazol."Cardiovascular Drugs and Therapy. 13. 105-113 (1999)

[文献書誌] 清末 達人: "糖尿病ラットにおける心筋イオンチャネル異常"心臓. 31(3). 183-188 (1999)

[文献書誌] 清末 達人: "Altered expression of cardiac K^+ channel genes during sub-acute and healing phases of myocardial infarctiopn."Cardiovascular Research. 44. 13-16 (1999)

[文献書誌] 王 金城: "Bepridil differentially inhibits two delayed rectifier K^+ currents,I_<Kr> and I_<Ks'> in guinea-pig ventricular myocytes."Britsh Journal of Pharmacology. 128. 1733-1738 (1999)

[文献書誌] 清末 達人: "Practical Seminar 不整脈"日本医事新報社(印刷中).

1999 年度実績報告書

清末達人大分医科大学, 医学部, 助教授 (90128348)

[文献書誌] 尾崎任明: "Effect of bepridil 0n intracellular calcium concentration and contraction in cultured rat ventricular myocytes."Journal of Cardiovascular Pharmacology. 33. 492-499 (1999)

[文献書誌] 安部隆子: "Inhibition of Na^+-K^+ pump alleyiates the shortening of action potential duration casued by metabolic inhibition via blockade of K_<ATP> channels in coronary perfused ventricular mucscle of guinea pigs."Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 31. 533-542 (1999)

[文献書誌] 松井一哲: "Effects of pimobendan on the L-type Ca^<2+> current and developed tention in guinea-pig ventircular myocytes and papillary muscle:Comparison with IBMX,milrinone and cilostazol."Cardiovascular Drugs and Therapy. 13. 105-113 (1999)

[文献書誌] 清末達人: "糖尿病ラットにおける心筋イオンチャネル異常"心臓. 31(3). 183-188 (1999)

[文献書誌] 清末達人: "Altered expression of cardiac K^+ channel genes during sub-acute and healing phases of myocardial infarctiopn."Cardiovascular Research. 44. 13-16 (1999)

[文献書誌] 王金城: "Bepridil differentially inhibits two delayed rectifier K^+ currents,I_<Kr> and I_<Ks'> in guinea-pig ventricular myocytes."Britsh Journal of Pharmacology. 128. 1733-1738 (1999)

[文献書誌] 清末達人: "Practical Seminar 不整脈"日本医事新報社(印刷中).