胆汁輸送・分泌機構に関する分子生物学的研究

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09877101
• 研究機関: 旭川医科大学
• 研究代表者: 牧野 勲 旭川医科大学, 医学部, 副学長 (60088854)
• 研究分担者: 田中 廣壽 旭川医科大学, 医学部, 助教授 (00171794)
• キーワード: トランスポーター / 遺伝子発現 / 胆汁酸 / リン脂質 / 消化器病学 / 分子生物学

研究概要

本研究は胆汁分泌に関与するトランスポーターの機能を解析するシステムを新たに構築し、従来不明であったトランスポーターの肝細胞の極性の発現との関係、あるいはその基質となりうる胆汁酸・リン脂質・薬剤の作用を解明することを目的とする。
平成9年度は有核細胞におけるトランスポーターmdr2,mrp発現系の構築に焦点を当てた。すなわち、蛍光蛋白としてオワンクラゲ由来のgreen fluorescent protein(GFP)を用いてmdr2,mrpを融合蛋白の形で発現させようというものである。
1.GFPの発現系はグルココルチコイド受容体などの蛋白においてすでに順調に稼働している。また、30℃、37℃いずれの培養条件化でも発光する変異体をも開発した。さらに、定量的画像解析システムも構築しつつあり、順調に準備が進んでいる。一方、現在までに、SV40エンハンサーを有する強制発現プラスミドに加え、α-フェトプロテイン遺伝子のプロモーター領域とGFP cDNAの間にmdr2,mrp cDNAを組み込み肝細胞特異的に発現させるアデノウイルスベクターのシステムを開発中である。平成10年度中にはこれらのコンストラクトを用いて胆汁輸送・分泌機構に関する分子生物学的知見の集積が見込めると考えている。

研究成果

• [文献書誌] Fuminori Hirano: "Functional interference between Sp1 and NF-kB through the same DNA binding site." Mol.Cell.Biol.(印刷中). (1998)
• [文献書誌] Masaki Hiramoto: "Nuclear-targeted suppression of NF-kB activity by the novel quinone derivative E3330" J.Immunol.(印刷中). (1998)
• [文献書誌] Kensaku Okamoto: "Restoration of the glucocorticoid receptor function by the phosphodiester compound of vitamin C and vitamin E,EPC-K1 via a redox-dependent mechanism." Biochem.Pharmacol.(印刷中). (1998)
• [文献書誌] Isao Makino: "From a choletic to an immunomodulator" J.Gastroenterol.Hepatol.(印刷中). (1998)
• [文献書誌] Shin-ichi Hayashi: "Functional susceptibility of estrogen receptor by redox change with reference to a role of thioredoxin as a mediator." Nucleic Acid Res.25(20). 4035-4040 (1997)
• [文献書誌] Takako Tani-Kawakami: "Effect of la-hydroxy vitamin D3 on serum levels of thyroid hormonoes in patients with untreated Graves'disease." Metabolism. 46(10). 1184-1188 (1997)
• [文献書誌] Hirotoshi Tanaka: "Molecular Pharmacology of Glucocorticoids" Kyushu Univ.Press(印刷中),
• [文献書誌] Hirotoshi Tanaka: "Redox Regulation of Cell Signaling and its Clinical Applications" Marcel Dekker Inc.(印刷中),