家族集積性胃癌関連遺伝子のRDA法による同定

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09877111
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 今井 浩三 札幌医科大学, 医学部, 教授 (60117603)
• 研究分担者: 伊東 文生 札幌医科大学, 医学部, 講師 (90223180) ; 日野田 裕治 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (10165128) ; 垣内 英樹 (財)北海道老年医学研究協会, 研究員
• キーワード: 家族集積性胃癌 / 新遺伝子 / RDA法 / DNA解析 / 遺伝子解析

研究概要

1. 胃癌集積家系の調査、検討、および家系構成者よりのDNA抽出
2世代以上にわたり3人以上の胃癌発症をみた家系を集積家系とした。396例の胃癌患者のうち16例(4.0%)が家族集積例であった。この16家系16例の胃癌症例の臨床病理学的特徴を解析した。これらの胃癌で占拠部位が噴門側に認められたものが16例中7例(44%)認められ、一般胃癌の15%(胃癌研究会報告)に比べ統計学的に有意に多かった。組織型は分化型5例(31%)、未分化型11例(69%)で、有意に一般胃癌より未分化型が多かった。また腹膜播種が15例中6例(40%)、肝転移が3例(20%)に認められ、一般胃癌に比べ有意に多かった。これらの家系のうち、解析に適当であると考えられる家系内において、出来るだけ多くの胃癌患者および健常者の組織(主にリンパ球)よりDNAを抽出した。同時に、家族集積性胃癌では若年発症の未分化型が多いことより、その条件を満たす胃癌よりDNAを抽出し同様にRDA法にて検索した。
2. RDA法によるDNAの解析
RDA法にはBam HI、Hind III、Bgl IIの3種の制限酵素を用いた。同一家系内と健常者DNAをこれらの制限酵素で切断した後、各々PCR法にて増幅しRDA法によりサブトラクションを行なった。この方法により、胃癌患者と健常者でDNA多型を示す多数のマーカーの検出を行った。若年発症の未分化型胃癌で得られたマーカーの一つは、EBウイルスの癌細胞への感染を示すものであった。

研究成果

• [文献書誌] Yoshida,Y., et al.: "Development of arbitrarily primed representaitional difference analysis (AP-RDA) method and chromosomal mapping of isolated high throughput genetic markers." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. in press. (1998)
• [文献書誌] Kakiuchi,H., et al.: "Familial gastric cancer in the Japanese polulation is frequently located at the cardiac region." Tumor Biol.in press. (1999)
• [文献書誌] Kusano,M., et al.: "Analysis for microsatelite instability and mutation of TGF-β RII in familial gastric cancer." Tumor Biol.in press. (1999)
• [文献書誌] Yoshida,Y., et al.: "Decreased DCC mRNA expression in human gastric cancer is clinico-pathologically significant." Int.J.Cancer. 79. 634-639 (1998)
• [文献書誌] Yawata,A., et al.: "Prolonged cell survival enhances peritoneal dissemination of gastric cancer cells." Oncogene. 16. 2681-2686 (1998)
• [文献書誌] Takaoka,A., et al.: "Supression of invasive properties of colon cancer cells by a metastasis suppressor KAII gene." Oncogene. 16. 1433-1453 (1998)