| 研究課題/領域番号 |
09877120
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| 研究機関 | 昭和女子大学 |
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研究代表者 |
鬼頭 昭三 昭和女子大学, 女性文化研究所, 教授 (00010140)
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| 研究分担者 |
仙波 純一 放送大学, 教養学部, 助教授 (30183429)
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| キーワード | β-estradiol / cDNA library / differential hybridization / 海馬 / 大脳皮質 / カイニン酸 / shot-gun PCR / cloning |
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| 研究概要 |
Wistar系雄性6週齢ラットに、β-estradiol 1mg/kgを連続7日間腹腔内投与した。β-estradiol投与群および非投与群の海馬および大脳皮質よりmRNAを抽出し、各々cDNA libraryを作製、λZAPIIvectorに組み込んだあと、in vitro packagingを行い、λphageに組み込んだ。diffrential hybridizationの原理に従って、100万plaquesのphageを1st screeningし、現在2nd screening中である。このとき使用しているprobe DNAは、投与群および非投与群の各々のcDNA libraryよりshot-gunPCRで調製したものである。投与群と非投与群との間の比較はprobeの違いで選別され、非投与群のcDNAをコントロールとしているので、screeningされるのは投与群のcDNAであり、投与群のみにsignalのあるphage cloneを拾った。hybridizationの方法は、non-radioactive methodで行った。カイニン酸投与群については、各々6mg/kg、12mg/kgの濃度のカイニン酸を腹腔内に1回投与した後4日目のラットを用いて、β-estradiol投与群同様に、非投与群をコントロールとして、100万plaquesを現在、1st screening中である。
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