1998 年度実績報告書

食用植物への遺伝子組込みによるヒトワクチンの開発

研究課題

研究課題/領域番号	09877144
研究機関	東京大学
研究代表者	牛島廣治東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (10091068)
キーワード	食用植物 / HIV / ワクチン / gp120 / レタス / 組込み
研究概要	本研究は、治療的ワクチンを含めたワクチンを植物を利用することで開発しようというものである。ワクチンの投与法については経口、経鼻法といった簡便性、日常性をもった方法の検討も研究の目的とする。平成10年までに既に次のことが可能となった。(1)組み込む遺伝子領域とウイルス株の選定:HIVのエンベロープ(gp120)にはエピトープとなる部位が複数あり、抗原性の高い領域である。このgp120遺伝子を組み込む領域とした。マクロファージ親和性ウイルスの1つの株であるBAL株を選んだ。(2)遺伝子の増幅:プライマーの存謹下でPCRをし、目的遺伝子を増幅した。(3)ベクターへの挿入:目的遺伝子をpUC12-35S-NOSプラスミドBamHI切断部位に挿入した(35SプロモーターとNOSターミネーター間に挿入次に、EcoRI、HindIIIで切断し植物細菌アグロバクテリウムのベクターBin19のT-DNA領域に挿入した。(4)細菌への導入と植物への導入:アグロバクテリウムツメファンテス細菌は自然界では、根頭癌腫病を引き起こし、独特の共存関係を営む。この現象は、アグロバクテリウムが植物に感染するとベクターBin19のT-DNA領域が植物のゲノムに移入されることによるものである。遺伝子を挿入したベクターBin19をアグロバクテリウムに導入した後、アグロバクテリウムを植物に感染させると、先の原理により目的遺伝子は植物のゲノムに移入された。(5)植物の分化・生育:今回は食用植物としてのレタスにHIVエンベロープ(gp120)遺伝子を導入し、カルスから分化させ形質転換植物を得た。(6)レタスの蛋白を葉から抽出し、ELISA法、ウエスタンブロット法でその発現を調べた。HIV抗体陽性血清と反応する蛋白の分画を認めた。このような粘膜免疫システムを応用したワクチン法は、HIVの感染者が増加している国内はもとより、感染が拡がり続けている開発途上国においても重要な戦略になりえるものと考える。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Kato H,Ushijima H: "Inhibition of tumor cell growth by murine splenic adherent cells stimulated with IFN-gamma." Int Arch Allergy Immunol. 115(2). 115-120 (1998)
[文献書誌] Matsui M,Ushijima H: "Detection of serotypes of astrouiruses by reverse transcription-polymerase chain reaction and bomologies of the types." Microbiol.Immunol.42. 539-547 (1998)
[文献書誌] Yagyu F,Ushijima H: "Cell tropisms,subtrpe,nucleotide diversity and drug resistance in saliva and blood of HIV-1." AIDS Research News letter. 11. 35-35 (1997)
[文献書誌] Kato H,Ushijima H: "Macrophage inhibition of lymphocyte and tumor cell growth is mediated by 25-hydroxy cholesterol in cell membrane." Int.Arch.Allergy.Immunol. 117. 78-84 (1998)
[文献書誌] Hakamada R,Ushijima H: "Expression and co-stimulatory fuction of B7-2 on murine CD4+T cells." Eur J Immunol. 28. 865-873 (1998)
[文献書誌] Ushijima H: "Cloning of a novel mamnose-binding protein that features an Ig-like domain." Eur J Cell Biol. 74 sup. 100-100 (1997)
[文献書誌] 牛島廣治(分担): "内科臨床リファレンスブック" 代表井村裕夫(中山書店), 総ページ420中339-348執筆 (1998)
[文献書誌] 牛島廣治(分担): "今日の治療指針" 代表多賀須幸男(医学書院), 1494(182-185) (1998)

1998 年度 実績報告書

食用植物への遺伝子組込みによるヒトワクチンの開発

研究代表者

牛島 廣治 東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (10091068)

研究成果

[文献書誌] Kato H,Ushijima H: "Inhibition of tumor cell growth by murine splenic adherent cells stimulated with IFN-gamma." Int Arch Allergy Immunol. 115(2). 115-120 (1998)

[文献書誌] Matsui M,Ushijima H: "Detection of serotypes of astrouiruses by reverse transcription-polymerase chain reaction and bomologies of the types." Microbiol.Immunol.42. 539-547 (1998)

[文献書誌] Yagyu F,Ushijima H: "Cell tropisms,subtrpe,nucleotide diversity and drug resistance in saliva and blood of HIV-1." AIDS Research News letter. 11. 35-35 (1997)

[文献書誌] Kato H,Ushijima H: "Macrophage inhibition of lymphocyte and tumor cell growth is mediated by 25-hydroxy cholesterol in cell membrane." Int.Arch.Allergy.Immunol. 117. 78-84 (1998)

[文献書誌] Hakamada R,Ushijima H: "Expression and co-stimulatory fuction of B7-2 on murine CD4+T cells." Eur J Immunol. 28. 865-873 (1998)

[文献書誌] Ushijima H: "Cloning of a novel mamnose-binding protein that features an Ig-like domain." Eur J Cell Biol. 74 sup. 100-100 (1997)

[文献書誌] 牛島廣治(分担): "内科臨床 リファレンスブック" 代表 井村裕夫(中山書店), 総ページ420中339-348執筆 (1998)

[文献書誌] 牛島廣治(分担): "今日の治療 指針" 代表 多賀須幸男(医学書院), 1494(182-185) (1998)

1998 年度実績報告書

牛島廣治東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (10091068)

[文献書誌] 牛島廣治(分担): "内科臨床リファレンスブック" 代表井村裕夫(中山書店), 総ページ420中339-348執筆 (1998)

[文献書誌] 牛島廣治(分担): "今日の治療指針" 代表多賀須幸男(医学書院), 1494(182-185) (1998)