感染症と免疫病の分子生物学と医学

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09CE2007
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 岸本 忠三 大阪大学, 医学部, 総長 (10093402)
• 研究分担者: 菊谷 仁 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (80161412) ; 清野 宏 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (10271032) ; 木下 タロウ 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (10153165) ; 山西 弘一 大阪大学, 医学部, 教授 (10029811)
• キーワード: 感染症 / 免疫病 / サイトカイン / インターロイキン6 / ヒトヘルペスウイルス / GPIアンカー / CD40 / 粘膜免疫

研究概要

(岸本グループ)
1) サイトカインのnegative feedback因子であるSSI-1・の生体内での機能を、そのノックアウトマウスの作製により解析した。作製されたマウスは発育不良、早期死亡を呈し、また免疫系細胞のアポトーシスが亢進していた。その機序としてSSI-1が腫瘍壊死因子(TNF)のシグナル伝達を阻害していることを示唆した。
2) プレB細胞増殖因子PBSFの受容体であり同時にHIVの第二受容体でもあるCXCR4欠損マウスを作製した。作製されたマウスは血球系細胞の著減、血管形成の不全など、PBSF欠損マウスと類似の形質を呈し、PBSFとCXCR4の一対一のリガンド・受容体関係が明らかになった。
3) 無ガンマグロプリン血症の責任遺伝子であるBtkの、Bリンパ球内のカルシウム関連シグナル伝達における意義を明らかにし、またBtkの活性抑制因子を同定した。
(山西グループ)
1) HHV-6Bの潜伏感染時に発現するmRNAを5種類見出した。次に、HHV-6Bと近縁であるヒトヘルペスウイルス7の潜伏感染遺伝子を一部同定した後、HHV-6Bのものと比較し、両者に保存されている蛋白を見出した。さらに、この保存されている蛋白は、Yeast Two-hybrid systemにより、血球系細胞のシグナル伝達に重要な働きをもつ、CyclophilinBリガンド(CAML)と結合する事が判明した。
2) HHV-6Bにコードされるケモカイン遺伝子U83どケモカイン受容体遺伝子U12を同定し、両分子とも機能性であることを示した。
3) ヒ卜へルペスウイルス8にコードされるウイルス性のIL-6がヒトのIL-6の産生を誘導する事を示し、キャッスルマン氏病の病因を示唆した。
(木下グループ)
1) GPIアンカー欠損細胞を血液系だけに持つ発作性夜間血色素尿症の新しいモデルマウスを作成した。このマウスの解析から、異常造血幹細胞の拡大には第2の要因が必須であること、GPIアンカー型タンパク質がT細胞の分化初期における増殖の負の制御に関わっていること、またB細胞の血液からリンバ組織への移行に重要であることがわかった。
2) 新規のGPI欠損変異細胞を発見し、第1のマンノースの付加に異常があることを示した。さらにその異常を相補する新規の生合成遺伝子PIG-Mをクローニングした。
3) トリパノソーマ、ブルセイのPIG-Bをノックアウトし、GPIアンカーが血流型の生存に必須であること、昆虫型の増殖にも非常に重要であることを示した。さらに、化学療法の有力な標的と考えられるGPIトランスアミダーゼのコンポーネントであるGPI8をクローニングした。
(清野グループ)
1) 炎症性腸疾患(IBD)発症の引き金となりうる禁止T細胞クローンのTCRの解析を進め、β鎖のホモダイマー(_<ββ>T細胞)というまったく新規のTCRを発現していることを見い出した。
2) 粘膜ワクチン開発を視野にいれて、呼吸器系粘膜免疫機構の解析を進めNALTにおけるTh1型、Th2型誘導機構を明らかにした。病原微生物由来抗原(例、PspA,p55gag)を粘膜アジュバントを併用して経鼻免疫することによりNALTを介して粘膜系と全身系に抗原特異的免疫応答が誘導されることを示した。
3) ヒトへの応用をふまえて遺伝子操作により開発された無毒化CTの粘膜アジュバント作用機序についての解析を進め、CTがスーパー抗原により誘導されるCD4^+T細胞のアナジー化を回避しヘルパー機能を維持させる働きがあることが分かった。
(菊谷グループ)
1) CD40からは少なくとも二種のシグナルが伝達され、B細胞の活性化、分化とクラススイッチには膜近位部からのシグナル、胚中心形成には膜遠位部からのシグナルが必要であることを示した。
2) EBウイルスの形質転換因子LMP1がCD40シグナルと同様にクラススイッチを含むリンパ濾胞外B細胞活性化と分化を誘導するが、胚中心B細胞分化を抑制することを示した。
3) CD100がCD40シグナルの標的遺伝子産物であり、クラススイッチを増強することを示した。
4) CD40欠損マウスではT細胞の自己反応性が上昇すること、更にこの自己反応性の上昇は、CD40-CD40L相互作用非存在下では抑制性T細胞が出現しないためであることを明らかにした。
5) NOD由来自己膵島反応性T細胞が認識するペプチドのモチーフを決定した。

研究成果

• [文献書誌] Futatani,T.: "Deficient expression of Bruton's tyrosine kinase in monocytes from X-linked agammaglobulinemia as evaluated by a flow cytometric analysis and its clinical application to carrier detection." Blood. 91. 595-602 (1998)
• [文献書誌] Takeda,K.: "Defective NK cell activity and Th 1 response in IL-18-dificient mice." Immunity. 8. 383-390 (1998)
• [文献書誌] Oh,H.: "Activation of phosphatidylinositol 3-kinase through glycoprotein 130 induces protein kinase B and p70 S6 kinase phosphrylation in cardiac myocytes." J.Biol.Chem.273. 9703-9710 (1998)
• [文献書誌] Matsushita,M: "Identification and characterization of a novel SH3-domain binding protein,Sab,which perferntially associates with bruton's tyrosine kinase(Btk)." Biochem,Biophys.Res.Comm.245. 337-343 (1998)
• [文献書誌] Wang,X-J.: "gp130,the cytokine common singal-transducer of interleukin-6 cytokine family.is downregulated in T cells in vivo by interleukin-6." Blood. 191. 3308-3314 (1998)
• [文献書誌] Okuda,Y.: "IL-6-deficient mice are resistant to the induction of experimental autoimmune encephalomyelitis provoked by myelin oligodendrocyte glycoprotein." Int.Immunol.10. 703-708 (1998)
• [文献書誌] Kunisada,K.: "Activation of gp130 transduces hypertrophic singnals via STAT3 in cardiac myocytes." Circulation. 98. 346-352 (19998)
• [文献書誌] Oshima,S.: "Interleukin 6 plays a key role in the development antigen-induced arthritis." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95. 8222-8226 (1998)
• [文献書誌] Yagi,H.: "Growth disturbance in fetel liver hematopoiesis of MII-mutant mice." Blood. 92. 108-117 (1998)
• [文献書誌] Tachibana,K.: "The chemokine receptor CXCR4 is essential for vascularization of the gastrointestinal tract." Nature. 393. 591-594 (1998)
• [文献書誌] Nagasawa,T.: "A novel CXC chemokine PBSF/SDF-1 and its receptor XCR4:their funcitons n development,hematopoiesis and HIV infection." Seminars in Immunol.10. 179-185 (1998)
• [文献書誌] Takeda,K.: "Stat3 activation is responsible for ILΞ6-dependent T cell proliferation through preventing apoptosis:generation and characterization of T cell-spedific Stat3-deficient mice." J,Immunol.161. 4652-4660 (1998)
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• [文献書誌] Tajagi,N.: "Blockage of Interleukin-6 receptor ameliorates ioint disease in murine collagen-induced arthritis." Arthritis Rheum.41. 2117-2121 (1998)
• [文献書誌] Ma,Q.: "Impaired B-lymphopoiesis,myelipoiesis,and derailed cerebellar neuron migration in CXCR4-and SDF-1-deficient mice." Proc.Natl.Acad.Sci,USA. 95. 9448-9453 (1998)
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• [文献書誌] Nonoyama,S.: "Functional analysis of the peripheral B cells patients with X-linked agammaglobulinemia" J.Immunol.161. 3925-3929 (1998)
• [文献書誌] Nagasawa,T.: "A CXC chemoking SDF-1/PBSF:A ligand for a HIV coreceptor CXCR4." Adv.Immunol.71. 211-228 (1998)
• [文献書誌] Hashimoto,S.: "A typical X-linked agammaglobulinemia(XLA)patients diagnosed in their adult ages." Internarl Medicine. in press. (1999)
• [文献書誌] Baba,Y.: "WASP is involved in the tyrosine kinase pathway in B-lineage cells." Blood. 93. 2003-2013 (1999)
• [文献書誌] Maeda,A.: "Paired immunoglobulin-like receptor B(PIR-B)inhibits BCR-induced activation of Sky and Btk by SHP-1." Oncogene. in press. (1999)
• [文献書誌] Na Ayuthaya PI: "The association of skin disease with human herpsevirus 8 infection in HIV carriers" Arch Virol.143. 1881-1891 (1998)
• [文献書誌] Fujisaki,H.: "Detection of human herpesvirus 7(HHV-7)DNA in breast milk by polymerase chain reaction and prevalence of HHV-7 antibody in breast-fed and bottle-fed children." J.Med.Virol.56. 275-279 (1998)
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• [文献書誌] Tomita,S.: "A homologue of Sachiaromyces cerevisiae Dpm 1 p is not sufficienct for synthesis of dolichol-phosphate-mannose in mammalian cells." J.Biol.Chem.275. 9249-9254 (1998)
• [文献書誌] Matsuki,M: "Defective atratum comeum early neonatal death in mice lacking the gene for transglutaminase 1(keratinocyte transglutaminase)." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95. 1044-1049 (1998)
• [文献書誌] Sutterlin ,C: "Saccharomyces cerevisiae GP100,the functional homolog glycosyphouspahatidy linositol95" Biochem.J. 332. 153-159 (1998)
• [文献書誌] Takahama,Y.: "Functional competence of T cells in the absene of glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins caused by T cell-specifice disruption of the Pig-a gene." Eur.J.Immunol.28. 2159-2166 (1998)
• [文献書誌] Maeda,Y.: "DPM2 regulates biosynthesis of dolichol phosphate-mannose in mammalian cells:correct subcellular localization and stabilizaiton of DPM 1,and binding of dolichol phosphate." EMBO J.17. 4920-4949 (1998)
• [文献書誌] Azenichi,Y.: "CD5-deficient blood cells and PIG-A gene abnormalities in Japanese patients with aplastic abaemia." Br,J.Haematol. in press. (1999)
• [文献書誌] Nozaki,M.: "Developmental abnormalities of glycosylphospatidylinositol-anchor deficient embyros revealed by Cre/loxP system." Lab.Invest. in press. (1999)
• [文献書誌] Watanabe,R.: "Mammalian PIG-L and its yeast homologue Gpi12p are N-acetyglucosaminy-phosphatidylinositol de-N-acetylases essential in glycosyliphosphatidylinositol biosynthesis." Biochemi.J.in press. (1999)
• [文献書誌] Hiro.T.: "Nasal immune system : Distinctive Th0 and Th1/Yh2 type enviroments in murine nasal associated lymphoid tissues and nasal passage,respectively." Eur,J.Immunol.28. 3346-3353 (1998)
• [文献書誌] Iijima,H.: "Orally-administered cholea toxin rescues murine gastrointestinal T cells from staphylococcal enterotoxin B-induced anergy" gastroenterology.115. 1197-1204 (1998)
• [文献書誌] Yamamoto,M.: "Mucosal intranet : epithelial cells down regulate intraepithelial but not peripheral T lymphocytes." J.Immunol.160. 2188-2196 (1998)
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• [文献書誌] Shimaoka,M.: "The influence of surgical stress on T cells : enhancement of early phase llymphocyte activation." Aneth,Analg. 87. 1431-1345 (1998)
• [文献書誌] Tatahashi, I: "T cells:Bodyguards and/or seepers in the gut" Chemical immunol.71. 77-78 (1998)
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• [文献書誌] Takahashi,I.: "Clonal expansion of CD4+TCR_<ββ>+T cells in T cellreceptor β-chain deficient mice by gut-derived antigens." J,Immunol.162. 1843-1850 (1999)
• [文献書誌] Kweon,M-N,: "Mucosally-induced systemic T cell unresponsiveness to ovalbumin requires CD40 interactions." J.Immunol.in press. (1999)
• [文献書誌] Tori,M: "The significant role of intragaftlymphoid tissues in preventing IDDM(insulin-dependent diabetes mellitus)recurrence in whole pancreaticoduodenal transplantation." J.Micro Surgery. in press. (1999)
• [文献書誌] McGhee,J.R.: "Mucosal Th1-versus Th-2-type respinses for antibody or cell mediated immunity to SIV rhesus macaques" J.Infect.Dise. in press. (1999)
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• [文献書誌] Yoshida,K.: "Cytokie Knockouts" Humana Press Inc, 26 (1998)
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• [文献書誌] James,S.P.: "Mucosal Immunology" Academic Press, 16 (1998)
• [文献書誌] Kurono,Y: "Mucosal Solutions,Advances in Mucosal Immunology" SMI,Maryland, 5 (1998)
• [文献書誌] McGhee,J.R.,: "Fundamental Immunology 4th Edition" Lippincott-Raven Press,Philadelphia, 47 (1998)
• [文献書誌] Takahashi,I.: "Induction and Modulation of Gastrointestinal Inflammation" FALK Proceeding, 5 (1998)
• [文献書誌] VanCott,J.L.: "Recent Advances in Otitis Media(in press)" Academic Press, (1999)
• [文献書誌] Boyaka,P.N.: "Strategies for mucosal vaccine development(in press)" Tropical Medicine, (1999)
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