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今年度は、アスコルビン酸生合成経路改変トマト作製のため、目的遺伝子としてすでに高等植物でアスコルビン酸生合成の律速酵素と考えられているGDP-L-ガラクトースフォスフォリラーゼ(VTC2)およびGDP-D-マンノースエピメラーゼ(GME)、また我々が発見したガラクチュロン酸経路構成酵素D-ガラクチュロン酸還元酵素およびアルドノラクトナーゼを恒常型発現型35Sあるいは、光誘導性rbcs、果実特異的E8プロモーターの制御下で多重遺伝子導入用ベクターR2pGWBに導入したコンストラクトを作製し、目的のトマト(Micro Tom)に形質転換を進めている。また、トマト果実におけるアスコルビン酸蓄積機構の解明として、果実成熟段階のマンノース/ガラクトース経路構成酵素遺伝子の発現レベル、16C標識アスコルビン酸による転流、生合成前駆体投与によるアスコルビン酸蓄積能への影響、ガラクツロン酸経路構成酵素活性について検討した結果、結実直後のimmature green段階では、マンノース/ガラクトース経路とソース器官からの転流がアスコルビン酸蓄積の鍵になっていることを明らかにした。また、成熟段階のトマト果実ではマンノース/ガラクトース経路構成酵素遺伝子の発現レベルが低下し、反対にガラクツロン酸経路のD-ガラクチュロン酸還元酵素およびアルドノラクトナーゼ活性が誘導されることから、成熟後期ではマンノース/ガラクトース経路に代わって新たにガラクツロン酸経路が誘導され、アスコルビン酸量の増加に貢献していることを明らかにした。
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