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本年度の研究では、in vitro実験系において通常のEF-1alphaと同様に、珪藻EFLタンパク質がGTP加水分解活性にともなうタンパク質合成能があるかを検証することを試みた。EFLの機能解析に供するサンプルを作成するため、EFLリコンビナントタンパク質を大量発現する大腸菌を作成した。N-末端領域に結合させたHQタグを利用してカラム精製を行った。このリコンビナントタンパク質がGTPおよび蛍光アミノアシル-tRNAに結合するか調べた結果、実験の再現性は高くなかったものの、本リコンビナントタンパク質はGTPおよびアミノアシル-tRNAに結合することが分かった。本研究成果は、追加実験が必要であるものの、タンパク質合成酵素EF-1alphaのパラログであるEFLタンパク質にもタンパク質合成能があることを示唆した最初のデータである。また、これまでEFL遺伝子とEF-1alpha遺伝子を両方有している生物は珪藻および真菌類一種のみで報告されていたため、このような生物は極めて例外的であると考えられていた。しかし、公開されつつある様々な真核生物のドラフトゲノムを精査した結果、EF-1alpha遺伝子またはEFL遺伝子のみを有する種に加え、アプソゾアThecamonasおよびツボカビ類Spizellomycesが珪藻と同様にEFLとEF-1alpha遺伝子をゲノム中に有していることが判明した。昨年度までに本研究によって、ゴニオモナス類やラン菌類でも同様に両遺伝子を細胞内で使用していることが分かっていることから、真核生物内でEFL遺伝子とEF-1alpha遺伝子を両方有する生物は数多く存在し、従来の「例外である」とする考え方を変える必要がある。
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