多発性骨髄腫のサイトカインシグナル伝達におけるネガティブフォードバック機構の解析-SSI-1導入による遺伝子治療の試み-

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10153237
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 吉崎 和幸 大阪大学, 健康体育部, 教授 (90144485)
• 研究分担者: 松本 智成 大阪大学, 健康体育部, 助手 ; 西本 憲弘 大阪大学, 健康体育部, 助教授 (80273663)
• キーワード: ミエローマ / SSI-1 / ネガティブフィードバック / IL-6 / STAT-1 / STAT-3

研究概要

IL-6は骨髄腫細胞の増殖因子であり、かつデキサメサゾンが誘導する骨髄腫細胞のアポトーシスを阻害する。STATs-induced STAT inhibitor-1(SSI-1)はIL-6刺激によりSTATlとSTAT3のリン酸化を介して誘導され、JAKに結合しJAKの機能を阻害してIL-6によるSTATlとSTAT3のリン酸化を抑制する、IL-6シグナルのネガティブフィードバック因子であり、多発性骨髄腫の病態に関与する可能性がある。そこで骨髄腫細胞株を用いてSSI-1の発現ならびにIL-6による発現の誘導の可否を検討し、SSI-1の発現異常の有無を検討した。実験に用いた6種類の骨髄腫細胞株(OCI-My5、RPM18226、U266、Hs、ARH77、IM9)のうち、OCI-My5、RPMI8226、U266ではIL-6の刺激後30分でSTAT-1とSTAT-3の一過性のチロシンリン酸化が誘導され、それに引き続き約60分をピークとするSSI-1の一過性の発現誘導が観察された。一方、Hs、ARH77、IM9の3株では無刺激の状態でもSSI-1は大量に発現されており、IL-6を用いた刺激を行っても発現量に変化はなかった。さらにこれらの細胞株ではSTAT-1とSTAT-3のチロシンリン酸化は認められなかった。そこでSTATlとSTAT3のリン酸化が生じSSI-1が誘導されるグループよりOCI-My5、STATリン酸化は生じず、SSI-1が恒常的に発現しているグループより,ARn77を用いSSI-1の遺伝子の強制発現ならびにSSI-1の遺伝子消去実験を行った。OCI-My5へのSSI-1導入によりIL-6によるSTAT-1とSTAT-3のリン酸化は抑制された。またARH77においてはSSI-1の消去によりIL-6によるSTAT-3のリン酸化が回復した。以上により、骨髄腫細胞株の一部にはSSI-1の恒常的発現があり、それがIL-6のシグナル阻害に関与していることを確認すると同時に、SSI-1遺伝子導入によるIL-6依存性骨髄腫の治療の可能性を明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Takagi N, M.Mihara, Y.Moriya, N.Nishimoto, K.Yoshizaki, T.Kishimoto, Y.Takeda, Ohsugi Y: "Blockage of Interleukin-6 receptor ameliorates joint disease in murine collagen-induced arthritis" Arthritis Rheum. 41. 2117-2121 (1998)
• [文献書誌] Matsuno H, Sawai I, Nezuka L, Uzuki M, Tsuji H, Nishimoto N, Yoshizaki K: "Treatment of rheumatoid synovitis with anti-reshaping human interleukin-6 receptor monoclonal antibody-use of Rheumatoid Arthritis tissues implants in the SCID mouse model" Arthritis Rheum. 41. 2014-2021 (1998)
• [文献書誌] Isumi Y, N.Minamino, A.Kubo, N.Nishimoto, K.Yoshizaki, M.Yoshioka, K.Kangawa, H.Matuso: "Adrenomedullin stimulates IL-6 production in Swiss 3T3 cells" Biochem.Bioph.Res.Co.244. 325-331 (1998)
• [文献書誌] Johkoh T, N.L.Muller, K.Ichikado, N.Nishimoto, K.Yoshizaki, et al.: "Intrathoracic multicen tric castleman disease : CT findings in 12 patient." Radiology. 209. 477-481 (1998)
• [文献書誌] Futatani T, T.Miyawaki, S.Tsukada, S.Hashimoto, et al.: "Delicien expressionol Bruton's lyrosine kinase in monocylesirom x-Linked・Agammaglobulinemia as evaluated by a flowcytometric analysis and its clinical application to camer derection" Blood. 91. 1-9 (1998)
• [文献書誌] Yoshizaki K, Nishimoto N, Mihara M, Kishimoto T: "Therapy of RA by blocking IL-6 signal transduction with humanized anti-IL-6 receptor antibody" Springer Seminars in immunopathology. 20. 247-259 (1998)