T細胞認識腫瘍抗原の解析と腫瘍ワクチン

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10153241
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 中山 睿一 岡山大学, 医学部, 教授 (60180428)
• 研究分担者: 小野 俊朗 岡山大学, 医学部, 助手 (50185641) ; 上中 明子 岡山大学, 医学部, 助手 (50273967)
• キーワード: 腫瘍免疫 / マウス白血病 / 腫瘍エスケープ / 拒絶抗原 / 細胞障害性T細胞 / 調節性T細胞

研究概要

1. pRL1a抗原欠失RL♂1変異株RM2-1細胞の作成
RL♂1細胞をCB6F_1マウス牌細胞由来のpRL1a特異的atと培養した。ほとんどの細胞は死滅するが、生き残る細胞を再度CTLと培養した。この操作を繰り返すことにより、pRL1a特異的CTLにより傷害されなくなったRL♂1変異株RM2-1を得た。RM2-1細胞には、親株でみられたakt mRNAの過剰発現および59KDaの変化したAkt分子は認められなかった。一方、H-2クラスIK^d、D^dあるいはL^d分子の発現は親株RL♂1と同等であった。
2. RL♂1の腫瘍増殖と免疫学的回避の機構
Akt欠失株RM2-1は、1×10^7個もの細胞を用いても、CB6F_1だけでなく同系BALB/cマウスにおいても、一旦、増殖して腫瘤を形成した後に拒絶きれた。一方、親株RL♂1は、1×10^6以下の細胞数でやっとCB6F_1で拒絶される。BALB/cマウスではRL♂1はほとんど拒絶されることはない。このように、親株RL♂1は、強いCTL認識抗乱Aktを発現しているにも拘らず、有効な拒絶反応を誘導しない。この細胞性機構を解析するため、モノクローナル抗体を用いてCD4T細胞をin vivoで除去した。この結果、CB6F_1およびBALB/cマウスとも、CD4T細胞の除去により、CD4T細胞非除去対照マウスでは増殖する細胞数のRL♂1を拒絶した。さらに、この場合のCTLの誘導を検討した。CD4除去RL♂1拒絶マウスに誘導されるCTLは、pRL1aをドミナントに認識し、RM2-1細胞を弱く傷害した。しかし、RL♂1腫瘍を背部に有するCB6F_1およびBALB/cマウス牌細胞には、pRL1aを認識するCTLは誘導されなかった。

研究成果

• [文献書誌] Takaki,T.,et al.: "Variable expression on lung cancer cell lines of HLA-A2-binding MAGE-3 peptide recognized by cytotoxic T lymphocytes." Int.J.Oncol.12. 1103-1109 (1998)
• [文献書誌] Manki,A., et al.: "Vaccination with multiple antigen peptide as rejection antigen pepide in murine leukemia." Cancer Res.58. 1960-1964 (1998)
• [文献書誌] Honda,S., et al.: "Possible involvement of autoreactive CD4 T cells in generation of cytotoxic T lymphocytes on vitro stimulation with H-2 class I-binding tumor antigen peptide." Int.Immunol.10. 1167-1174 (1998)
• [文献書誌] Ishii,T., et al.: "Isolation of MHC class I restricted tumor antigen peptide and its precursors associated with heat shock proteins-hsp70, hsp90 and gp96." J.Immunol.(in press).
• [文献書誌] Nakayama,E., et al.: "Identification of tumor rejection antigen peptide recognized by cytotoxic T lymphocytes on murine leukemia RL♂1 and the effect of vaccination." Gann Monograph on Cancer Research. (in press).