Semaphorin E誘導によるがん薬剤耐性機構の解明と臨床的意義の検討

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10153271
• 研究機関: 国立がんセンター
• 研究代表者: 山田 哲司 国立がんセンター, 研究所病理部, 室長 (30221659)
• 研究分担者: 広橋 説雄 国立がんセンター, 研究所, 副所長 (70129625)
• キーワード: Semaphorin E / がん薬剤耐性 / cisplatin / CDDP / 染色体7番 / 転写調節領域 / 転写因子結合部位

研究概要

がん化学療法において初回治療に良好な反応性を示した腫瘍でも、治療後の再発時にはしばしば同じ薬剤に反応せず、また使用していない制がん剤や放射線治療に対しても抵抗性をしめし、治療を困難とすることが多い。このため、がんの化学療法の成績改善にはがんの薬剤耐性機構の解明が必須である。CDDP耐性卵巣がん培養細胞TYKnuRのcDNA発現libraryよりfunctional screeningを行い、CDDP耐性細胞で発現が亢進し、またCDDP感受性細胞に薬剤耐性形質を与える遺伝子としてmouse semaphorin Eと相同性をしめすhuman cDNAを単離した。腫瘍の薬剤耐性マーカーとしてsemaphorin E発現検出の臨床的な有効性と薬剤耐性腫瘍におけるsemaphorinEの誘導機構を明らかにする目的で研究を行い、以下の諸点について成果があげられた。
1. 染色体7番よりヒトsemaphorinEの転写調節領域がふくまれていると思われる上流領域を含む遺伝子断片を単離した。Exon1とintron1をふくむ約5.2kbの塩基配列を決定した。
2. Exon1の5′側にはSpl、Ap-2、MyoD、TCF等の転写因子結合部位が想定された。
3. 臨床例においてsemaphorinE蛋白の発現を検索する為に、epitopeの異なる4種の抗semaphorinEペプチド抗体作製した。
4. Epitope tagを付加したsemaphorinEを発現するeukaryotic expression constructを作製した。

研究成果

• [文献書誌] Yamada,T.,Hirohashi,S.,et al.: "Identification of semaphorin E as a non-MDR drug resistance gene of human cancers." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.,. 94. 14713-14718 (1997)
• [文献書誌] Honda,K.,Yamada,T.,Hirohashi.S.,et al.: "Actinin-4, a novel actin-bundling protein associated with cell motility and cancer invasion." J.Cell.Biol.,. 140. 1383-1393 (1998)
• [文献書誌] Yoshioka,H.,Yamada,T.,Hirohashi,S.,et al.: "Analysis of loss of heterozygosity in small adenocarcinomas of the lung." Jpn.J.Clin.Oncol.,. 28. 240-244 (1998)
• [文献書誌] Anami Y.,Yamada,T.,Hirohashi,S.,et al.: "A case of double primary adenocarcinoma of the lung with multiple atypical adenomatous hyperplasia." Pathology International.48. 634-640 (1998)
• [文献書誌] Takaoka,A.S.,Yamada,T.,Hirohashi,S.,et al.: "Cloning and characterization of the human β4-integrin gene promoter and enhancers." J.Biol.Chem.273. 33848-33855 (1998)