サブプレートニューロンの大脳皮質神経回路形成における役割の解析

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10156218
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 桝 正幸 筑波大学, 基礎医学系, 教授 (20243032)
• キーワード: 神経回路 / 軸索ガイダンス / サブプレートニューロン / 大脳皮質

研究概要

神経機能は神経細胞間の正確な結合の上に成り立っている。サブプレートニューロンは大脳皮質で最初に生まれる機能的な神経細胞であり、主に形態学的な研究から、視床皮質路の形成や大脳皮質の領域分化、視優位カラムの形成などに関わると提唱されているが、神経回路形成における生理機能については未だ良く分かっていない所が多い。本研究ではサブプレートニューロンをimmunotoxinにより任意の時期に破壊する事の出来るトランスジェニックマウスを作成し、神経回路形成における生理的役割を明らかにする事を目的とした。
申請者は筑波大学へ赴任したばかりであり、研究室を立ち上げ種々の実験が行える環境を整備する必要があった。そこで本年度は主に分子生物学実験のセットアップと予備実験を中心に行った。その結果、遺伝子ライブラリーの作成、遺伝子ライブラリーのスクリーニング、DNA配列決定等の分子生物学的実験が一通り行える様になり、将来的に軸索ガイダンス蛋白の機能を調べる為に用いる予定の神経細胞初代培養系も確立できた。実験の成果としてはフロアプレート特異的遺伝子をサブトラクティブ・ハイブリダイゼーションにより複数個単離した事が挙げられる。現在はその機能的解析を進めているが、この研究に用いた手法は本申請課題の遂行にも有用であると考える。

研究成果

• [文献書誌] Masu, M.et al.: "Specific Deficit of the ON Response in Visual Transmission by Targeted Disruption of the mGluR6 Gene." Cell. 80. 757-765 (1995)
• [文献書誌] Tokita, Y.et al.: "Characterization of Excitatory Amino Acid Neurotoxicity in N-methyl-D-aspartate Receptor-deficient Mouse Cortical Neuronal Cells." European Journal of Neuroscience. 8. 69-78 (1996)
• [文献書誌] Keino-Masu,K.et al.: "Deleted in Colorectal Cancer(DCC)Encodes a Netrin Receptor." Cell. 87. 175-185 (1996)
• [文献書誌] Ueda, Y.et al.: "The mGluR6 5' Upstream Transgene Sequence Directs a Cell-Specific and Developmentally Regulated Expression in Retinal Rod and ON-Type Cone Bipolar Cells." The Jounal of Neuroscience. 17. 3014-3023 (1997)
• [文献書誌] Fazeli, A.et al.: "Phenotype of mice lacking functional Deleted in Colorectal Cancer(Dcc)gene." Nature. 386. 796-804 (1997)
• [文献書誌] Leonardo, E.D.et al.: "Vertebrate homologues of C.elegancs UNC-5 are candidate netrin receptors." Nature. 386. 833-838 (1997)
• [文献書誌] Masu, M.et al.: "Molecular Basis of Axon Growth and Nerve Pattern Formation." Edited by H.Fujisawa., 280 (1997)