微小環境における腫瘍細胞の悪性誘導機序の解析と制御

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10169218
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 宮本 謙一 金沢大学, 大学院・自然科学研究科, 教授 (30100514)
• 研究分担者: 村山 次哉 金沢医科大学, 助教授 (60159184) ; 野村 政明 金沢大学, 自然科学研究科, 助手 (20247480) ; 横川 弘一 金沢大学, 自然科学研究科, 助教授 (50283122)
• キーワード: 腫瘍 / 悪性 / シスプラチン耐性 / in vivo薬剤耐性 / メタロチオネイン / トランスポーター / cMOAT

研究概要

腫瘍細胞は生体内の微小環境にいて生体内因子に応答して悪性形質を発現していると考えられる。AH66細胞はin vivoでシスプラチン(CDDP)耐性を示す。そこで、対照細胞としてAH66から分離されたAH66F細胞を用い、AH66細胞のin vivo耐性の機序を検討した。
AH66F細胞のin vitroにおけるCDDP感受性は、腹水の添加によってもIL-1β、IL-6、TNF-αの添加によっても全く変化しなかったが、AH66細胞のCDDP感受性は、腹水の添加だけでなく、IL-1β、TNF-αにより有意に低下した。そして、この感受性の変化は、PKC阻害剤で抑制できたが、PKA阻害剤の影響を受けなかった。
細胞内メチロチオネイン(MT)含量を測定したところ、AH66F細胞ではいずれの処置によってもMT含量は変化することはなかったが、AH66細胞は、腹水中で培養することによりMT量が著しく増加することが明らかとなった。
さらにAH66細胞を腹水中で培養することによりCDDP取り込み量が低下することも見出した。これに伴い、細胞外へのCDDP排出量が増加した。CDDPはグルタチオン抱合した後、アニオントランスポーターにより細胞外へ排出されるため、AH66細胞に発現しているアニオントランスポーターを検索したところ、MRP、cMOATの他数種類のトランスポーターの発現を確認した。しかし、腹水により発現量が変化したのはcMOATのみであった。対照細胞のAH66Fでは、CDDP取り込み量はAH66細胞より著しく高く、上記のような処理によっても細胞内CDDP量には変化がなかった。また、AH66F細胞はMRPを発現していたが、cMOATmRNAの発現は確認できなかった。
以上のように、in vitroでは検知し得ないin vivo薬剤耐性を提示できたこと、この様な現象が生体内での癌細胞の増殖環境で起こっていることを示したことは意義深いものと考える。

研究成果

• [文献書誌] Yasuyuki Sadzuka: "1-Methyl-3-propyl-7-butylxanthine,as a novel biochemical modulator,enhances therapeutic etlicacy of adriamycin." Jpn.J.Cancer Res.89. 228-233 (1998)
• [文献書誌] Akira Kaji: "Studies on the cytotoxicity of asterriquinene derivatives." J.Antibiotics. 51. 235-238 (1988)
• [文献書誌] Kenji Yamamoto: "Relationships between the structure and electronic properties." Biol.Pharm.Bull.....21. 356-359 (1998)
• [文献書誌] Makoto Tanizawa: "Phosphodiesterase IV inhibitors synergistically potentiate relaxation induced by forskolin in guinea-pig trachea." Clin.Exp.Pharmacol.Physiol.25. 114-119 (1998)
• [文献書誌] Akira Kaji: "Preparation and structure-activity relationship of novel asterriquine derivatives." Chem,Pharm,Bull.46. 1325-1329 (1998)
• [文献書誌] Akira Kaji: "Relationship between the structures and ciytotoxic activity of asterriquinone,an antifumor metablite of Aspergillus terreus,and...." Biol.Pharm.Bull.21. 945-949 (1998)