• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

1998 年度 実績報告書

ORP150のストレス蛋白としての役割に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 10172214
研究機関大阪大学

研究代表者

小川 智  大阪大学, 医学部, 助教授 (90283746)

研究分担者 山下 俊英  大阪大学, 医学部, 助手 (10301269)
玉谷 実智夫  大阪大学, 医学部, 助手 (30294052)
遠山 正彌  大阪大学, 医学部, 教授 (40028593)
キーワード分子シャペロン / 虚血 / 小胞体 / ストレス応答 / 低酸素 / ATP親和性 / Glucose regulated protein
研究概要

ORP150は脳虚血にあって強い抵抗性を示すアストログリアより同定された新規ストレス蛋白であり、ERに存在する他の分子シャペロンであるGRP78(78kDa Glucose Regulated Protein)やGRP94などと同様にATP依存性に分子シャペロンとしての機能も有しており、蛋白輸送や蛋白のmaturationに関与していると考えられる。そこで、ORP150の分子シャペロンとしての機能を検討するために、MDCK(Madin-Darby Canine Kidney)細胞を用いて、ORP150 antisense transformant(ORP150(-))株を樹立した。Wild typeのMDCK細胞では実際、ORP150が分秘蛋白であるGP80/ClusterinとER内で結合していた。そこで、pulse-chase法を用いたmetabo11c labelingによる検討を行った。低酸素曝露されたORP150(-)株はwi1d typeに比べてGP80/ClusterinがERにretentionし、maturationが遅延する傾向を得た。このことは、ORP150が蛋白輸送やmaturationに重要であることを示唆している。
また、ATPクロマトグラフィーやATP kineticsを行い、ATPに対する親和性について検討した。その結果、ORP150は強いATP親和性を持ち、GRP78や94と比べて、より少ないATP濃度でGP80/Clusterinを解離させることが可能であった。このことからORP150はGRP78などと同様に強いATP親和性を持つだけでなく、これら分子シャペロンの中で最も効率の良い分子シャぺロンであることが示され、このことがアストログリア内で虚血環境下にERの機能を保持することによって細胞死を防いでいると考えられた。

  • 研究成果

    (6件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (6件)

  • [文献書誌] Ozawa et al.: "ORP150(150 kDa oxygen-regulated protein)suppresses hypoxia-induced apoptotic cell death." J.Biol.Chem.(In press). (1999)

  • [文献書誌] Imuta et al.: "Induction of 72 kDa inducible heat shock protein(HSP72)in cultured rat astrocytes after energy depletion." J.Neurochem.70. 550-556 (1998)

  • [文献書誌] Matsuo et al: "Cloning of a putative vesicle transport-related protein,RA410,from cultured rat astrocytes and its expression in ischemic rat brain." J.Biol.Chem.272. 16438-16444 (1998)

  • [文献書誌] Tacke et al.: "Human Tra2 proteins are sequence-specific activators of pre-mRNA splicing." Cell. 93. 139-148 (1998)

  • [文献書誌] Tamatani et al.: "Involvement of Bcl-2 family and caspase-3-like activity peoteinase in NO-mediated neuronal apoptosis." J.Neurochem.71. 1588-1596 (1998)

  • [文献書誌] Yan et al.: "An intracelluar protein that binds amyloid-beta protein and mediates neurotoxicity in Alzheimer's diease." Nature. 389. 689-692 (1997)

URL: 

公開日: 1999-12-11   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi