1998 年度実績報告書

HIV感染におけるT細胞アポトーシス誘導機序

研究課題

研究課題/領域番号	10180206
研究機関	東京医科歯科大学
研究代表者	小柳津直樹東京医科歯科大学, 感染分子制御学講座, 助教授 (00282773)
研究分担者	八木田秀雄順天堂大学, 医学部・免疫学講座, 助教授 (30182306)
キーワード	T細胞死 / アポトーシス / CD4分子 / TRAIL / gp120
研究概要	T細胞アポトーシスに関与する分子群としてFas/FasL系に加えTRAIL(TNF-related apoptosis-inducingligand)の関与が近年明らかにされている。我々は末梢血単核細胞(PBMC)にHIV-1 gp120或いは抗CD4抗体を用いてのCD4クロスリンキング[CD4XL]処置により、単球の存在下にFas-FasL相関依存性にCD4^+T細胞選択的アポトーシスを誘導しうることをこれまでに明らかにした。CD4XLに加えての抗CD3抗体処置[CD4XL plusCD3]によりCD8^+T細胞のアポトーシス誘導システムも最近確立した。本年度はこのシステムにおけるTRAIL分子の関与を解析した。[CD4XL]システムではPBMCを抗CD4抗体処理後、抗マウス抗体を固相化プレート上で72時間培養;[CD4XLplusCD3]システムでは末梢血T細胞(PBT)にCD4XL、処置後24時間培養し抗CD3抗体(HIT3a)を添加、更に18時間培養し回収細胞をAnnexin Vあるいはpropidium iodide(PI)にて染色後flowcytometryでアポトーシスを定量した。この系におけるTRAILの関与を抗TRAIL抗体(RIK-2)および可溶性recombinant TRAILを用いて解析した。結果は、抗TRAIL中和抗体は[CD4XL]システムにおけるCD4^+T細胞、[CD4XL plus CD3]システムにおけるCD4^+およびCD8^+T細胞両者のアポトーシス誘導に対し投与量相関をもって抑制した。単球はin vitroの培養により一過性にTRAILを発現した。CD4XLによりCD4^+T細胞においてTRAIL発現が誘導された。可溶型TRAIL処置ではCD4XL、抗CD3抗体処置にかかわらず末梢血T細胞にアポトーシスは誘導し得なかった。上記の結果によりCD4XLによるT細胞アポトーシスにつきFasLに加えTRAILもまた細胞死誘導のeffector moleculeとして作動している声を明らかにした。[CD4XL plus CD3]でのCD8^+T細胞アポトーシス誘導ではTRAILを発現するCD4^+T細胞がその(細胞死誘導の)エフェクター細胞となっておりこの点HIV感染症におけるCTLの減少につき新たな機序の存在を示唆する。可溶型TRAILでT細胞死が誘導出来ない可能性として膜結合型TRAILによる細胞接触依存性細胞死シグナル伝達の機序を考えている。

研究成果

(5件)

すべてその他

すべて文献書誌 (5件)

[文献書誌] Aisaki K,Kanno H,Oyaizu N,Hara Y,Miwa S,Ikawa Y.: "Apoptotic changes precede mitochondrial dysfunction in red-cell-type pyruvate kinase mutant mouse erythroleukemia cell line." Jpn.J.Cancer Research. 90. 171-179 (1999)
[文献書誌] Hosaka N,Oyaizu N,Kaplan MK,Yagita H,and Pahwa S.: "Membrane and soluble forms of Fas(CD95)in perpheral blood mononuclear cell and in plasma from HIV infected individuals." J.Infectious Disease. 178. 1030-1039 (1998)
[文献書誌] 4.McCloskey TW.Oyaizu N.Bakshi S.Kowalski R.Kohn N.Pahwa S.: "CD95 expression and apoptosis during pediatric HIV infection-early upregulation of CD95 expression." Clincal Immunol.Immunopathol.87. 33-41 (1998)
[文献書誌] Koshiji M,Adachi Y,Sogo S,Taketani S,Oyaizu N,Ikehara S.: "Apoptosis of colorectal adenocarcinoma(COLO 201)by TNF-alpha and IFN-gamma resulting from down-modulation on of Bcl-2 expression." Clin.Exp.Hematol.111. 211-218 (1998)
[文献書誌] 小柳津直樹: "HIV感染における免疫不全の誘導機序" 臨床医. 24. 56-60 (1998)

1998 年度 実績報告書

HIV感染におけるT細胞アポトーシス誘導機序

研究代表者

小柳津 直樹 東京医科歯科大学, 感染分子制御学講座, 助教授 (00282773)

研究成果

[文献書誌] Aisaki K,Kanno H,Oyaizu N,Hara Y,Miwa S,Ikawa Y.: "Apoptotic changes precede mitochondrial dysfunction in red-cell-type pyruvate kinase mutant mouse erythroleukemia cell line." Jpn.J.Cancer Research. 90. 171-179 (1999)

[文献書誌] Hosaka N,Oyaizu N,Kaplan MK,Yagita H,and Pahwa S.: "Membrane and soluble forms of Fas(CD95)in perpheral blood mononuclear cell and in plasma from HIV infected individuals." J.Infectious Disease. 178. 1030-1039 (1998)

[文献書誌] 4.McCloskey TW.Oyaizu N.Bakshi S.Kowalski R.Kohn N.Pahwa S.: "CD95 expression and apoptosis during pediatric HIV infection-early upregulation of CD95 expression." Clincal Immunol.Immunopathol.87. 33-41 (1998)

[文献書誌] Koshiji M,Adachi Y,Sogo S,Taketani S,Oyaizu N,Ikehara S.: "Apoptosis of colorectal adenocarcinoma(COLO 201)by TNF-alpha and IFN-gamma resulting from down-modulation on of Bcl-2 expression." Clin.Exp.Hematol.111. 211-218 (1998)

[文献書誌] 小柳津直樹: "HIV感染における免疫不全の誘導機序" 臨床医. 24. 56-60 (1998)

1998 年度実績報告書

小柳津直樹東京医科歯科大学, 感染分子制御学講座, 助教授 (00282773)