ノックアウトマウスを使ったcPLA2の機能解析と新規cPLA2の探索

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10212203
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 和泉 孝志 群馬大学, 医学部, 教授 (70232361)
• 研究分担者: 清水 孝雄 東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (80127092) ; 大日方 英 群馬大学, 医学部, 助手
• キーワード: 生理活性脂質 / ホスホリパーゼA2 / ロイコトリエン / 血小板活性化因子 / 炎症性疾患

研究概要

当該研究期間の成果は以下の通りである。
1.細胞質型PLA2(cPLA2)欠損マウスの表現型の解析に関する研究
cPLA2欠損マウスの表現型の解析を、急性肺炎症モデルで行い、欠損マウスにおいては対照群と比較して著明な反応の減弱を認めた。すなわち、誤嚥性肺炎のモデルである、塩酸の気道内注入や、弱毒菌感染とエンドトキシンショックのモデルであるLPS投与による急性肺炎症反応を、気道抵抗、肺コンプライアンス、肺胞洗浄液中の細胞や漏出タンパク質、さらに肺組織所見で検討したところ、欠損マウスにおいてはいずれも著明な減弱を認めた。このことは成人型呼吸窮迫症候群(ARDS)における脂質メディエーターの関与を強く示すものである。
現在、このマウスを使って、マラリア感染実験を行い、脳マラリアなどの病態における本酵素の関与を検討中であり、そのための実験系の確立を行った。
2.新規PLA2に関する研究
カイニン酸で脳の海馬特異的に誘導されるcPLA2遺伝子由来の新規タンパク質を発見し、その生理的意義や遺伝子発現調節を解析中である。
α型以外の、β型およびγ型cPLA2をクローニングし、その活性、分布、遺伝子発現について解析中である。
3.生理活性脂質受容体の機能解析に関する研究
LTB4受容体を欠損したマウスを作成中であり、germline transmissionが完了した。
LTB4の第2受容体のリガンド特異性を報告した。
マウスにおける2種類のLTD4をクローニングしその性質を明らかにした。
肝切除後のクッパー細胞におけるPAF受容体の増加を報告した。

研究成果

• [文献書誌] Nagase,T., et al: "Acute lung injury by sepsis and acid aspiraion : a key role of cytosolic phospholipase A2"Nature Immunology. 1. 42-46 (2000)
• [文献書誌] Noiri,E., et al: "An in vivo approach showing the chemotactic activity of leukotriene B_4 in acute renal ischemic-reperfusion injury"Proc Natl Acad Sci USA. 97. 823-828 (2000)
• [文献書誌] Kato,K., et al: "Cell-specific transcriptional regulation of human leukotriene B4 receptor gene"J.Exp.Med.. 192. 413-420 (2000)
• [文献書誌] Yokomizo,T., et al: "A second leukotriene B4 receptor, BLT2. A new therapeutic target in inflammation and immunological disorders"J.Exp.Med.. 192. 421-432 (2000)
• [文献書誌] Kawasawa,Y., et al: "Brain-specific expression of novel G-protein-coupled receptors, with homologies to Xenopus PSP24 and human GPR45"Biochem. Biophys.Res.Commun.. 276. 952-956 (2000)
• [文献書誌] Kawasawa,Y., et al: "Mammalian PSP24s (alpha and beta Isoforms) are not responsive to lysophosphatidic acid in mammalian expression systems"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 276. 957-964 (2000)