アストロサイト機能の部位特異性と神経機能調整

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10214202
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 加藤 泰治 名古屋市立大学, 医学部, 教授 (60094364)
• 研究分担者: 三浦 裕 名古屋市立大学, 医学部, 助手 (90285198) ; 浅井 清文 名古屋市立大学, 医学部, 助教授 (70212462)
• キーワード: アストロアサイト / 神経栄養因子 / 神経機能調節 / グリア成長因子 / 部位特異性 / リポコルチン / SAGE

研究概要

平成11年度は、ラットの脳の部位別にアストロサイトを初代培養し、アストロサイト産生性の神経栄養因子(GMF-γ、LC1)の発現に部位特異性があるかどうか検討した。胎生18日ラット胎児より、大脳皮質、海馬、嗅脳、小脳、脊髄を分取し、中西らの方法に従い、アストロサイトの初代培養を行ない、GMF-γとLC1の発現はノーザンブロット法を用いた。各遺伝子の発現量の比較は、メンブレンごとに18srRNAで補正後、大脳皮質の発現量を100として表わした。フイルムを観察した印象と著しく異なるメンブレンNO.4の嗅脳のみを除き、得られたデータをStarView J4.01の分散分析を利用して解析した。その結果、アストロサイトにおけるGMF-γの発現量は小脳で多く、小脳と海馬では有意な差があることが観察された(p<0.05)。また小脳と大脳皮質と比較しても小脳でGMF-γの発現量が大きい傾向が観察された(但し、p<0.1で有意差はなし)。他の部位間では統計的に有意な差は観察されなかった。LC1については、小脳で発現が多く、脊髄、嗅脳で少ない傾向が観察された。統計上、小脳と脊髄、小脳と嗅脳の間で有意差があった。さらに現在、アストロサイト内での遺伝子発現の変化を捉えるため、部位別に培養したアストロサイトからmRNAを抽出し、SAGE(Serial Analysis Gene Expression)による解析を行っている。これによりアストロサイトの脳内部位特異的な遺伝子発現を捉えることが出来ると思われる。

研究成果

• [文献書誌] Katano, H.: "Traumatic injury in vitro induces IEG mRNAs in cultured glial cells, suppressed by co-culture with neurons"NeuroReport. 10. 2439-2448 (1999)
• [文献書誌] Sobue, K.: "Induction of blood-brain barrier properties in immortalized bovine brain endothelial cells by astrocytic factors"Neurosci. Res.. 35. 155-164 (1999)
• [文献書誌] Sobue, K.: "Molecular cloning of two bovine aquaporin-4 cDNA isoforms and their expression in brain endothelial cells"Biochim. Biophys. Acta. 1486. 389-394 (1999)
• [文献書誌] Hotta, T.: "Membrane-bound from of ADP-ribosyl cyclase in rat cortical astrocytes in culture"J. Neurochem.. 74. 669-675 (1999)
• [文献書誌] Fuse, T.: "p27Kip1 expression by contact inhibition as a prognostic index of human glioma"J. Neurochem.. (in press).
• [文献書誌] Tsuiki, H.: "Cloning of a rat glia maturation factor-γ (rGMFG) cDNA and expression of its mRNA and protein in rat organs"J. Biochem.. (in press).