ABC蛋白スーパーファミリーによる異物排出機構の解析

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10217202
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 鈴木 洋史 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 助教授 (80206523)
• 研究分担者: 伊藤 晃成 千葉大学, 薬学研究院, 助手 (30323405)
• キーワード: MRP2 / MRP3 / 有機アニオン / 胆汁酸 / 極性輸送 / 胆汁排泄

研究概要

胆管側膜排出トランスポーター多剤耐性関連蛋白2(MRP2/ABCC2)の機能解析をさらに進めた。その結果、ラットMRP2遺伝子産物を発現するSf9細胞のみならず、ラット胆管側膜ベシクルにおいても、還元型グルタチオンのATP-依存的輸送を検出することができた。還元型グルタチオンの排出は、胆汁酸非依存性胆汁流生成に極めて重要な役割を果たすものの、その機構は現在まで未解明であった。本研究は、はじめてその輸送機構を示唆した点で注目されるものと確信する。さらにMRP2による肝臓における胆汁酸恒常性維持について検討するため、MRP2と共に有機アニオン取り込みトランスポーターOATP2を同時に発現するMDCK細胞を用いた検討を進めた。その結果、taurolithocholic acid sulfateなどの硫酸抱合型胆汁酸の経細胞極性輸送を示すことができ、硫酸抱合型胆汁酸がMRP2基質となることをin vitroの系で直接的に示すことができた。
また、潅流実験を詳細に進めることにより、病態時においては、MRP3も肝臓における胆汁酸維持に役割を果たすことが示唆された。これらMRPファミリーとならび、breast cancer resistance protein(BCRP/ABCG2)の機能解析も進め、いくつかの新規リガンドを同定することに成功した。

研究成果

• [文献書誌] Sasaki, M., Suzuki, H., Ito, K., Abe, T., Sugiyama, Y.: "Transcellular Transport of Organic Anions Across a Double-transfected Madin-Darby Canine Kidney II Cell Monolayer Expressing Both Human Organic Anion-transporting Polypeptido (OATP2/SLC21A6) and Multidrug Resistance-associated Protein 2 (MRP2/ABCC2)"J. Biol. Chem.. (in press). (2002)
• [文献書誌] Itoda, M., Saito, Y., Soyama, A., Saeki, M., Murayama, N., Ishida, S., Sai, K., Nagano, M., Suzuki, H., Sugiyama, Y., Ozawa, S., Sawada: "J. Polymorphisms in the ABCC2 (cMOAT/MRP2) gene found in 72 established cell lines derived from Japanese individuals-An association between single nucleotide polymorphisms in the 5'-untranslated region and exon 28"Drug Metab. Dispos.. (in press). (2002)
• [文献書誌] Akita, H., Suzuki, H., Hirohashi, T., Takikawa, T., Sugiyama, Y.: "Transport activity of human MRP3 expressed in Sf9 cells : Comparative studies with rat MRP3"Pharm. Res.. 19. 34-41 (2002)
• [文献書誌] Ito, K., Suzuki, H., Sugiyama, Y.: "Single amino acid substitution of rat MRP2 results in acquired transport activity for taurocholate"Am. J. Physiol.. 281. G1034-G1043 (2001)
• [文献書誌] Akita, H., Suzuki, H., Sugiyama, Y.: "Sinusoidal efflux of taurocholate is enhanced in Mrp2-deficient rat liver"Pharm. Res.. 18. 1119-1125 (2001)