ヒトcMOATの遺伝疾病と癌への関与

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10217209
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 内海 健 九州大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (80253798)
• 研究分担者: 和田 守正 九州大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (20220965)
• キーワード: ABCトランスポーター / 抗がん剤感受性 / グルタチオン / Dubin-Johnson症候群 / 肝炎ウイルス / 大腸癌

研究概要

ABCトランスポーターの多くは生体内の様々な器官や組織において発現しており異物・毒物排出ポンプとしての重要な生理的作用をしている。がんにおける抗がん剤の感受性を制御する分子標的としての臨床診断へ利用するためにはABCトランスポーターのがんにおける特異的発現の分子的機構を把握することが必須である。
本年度は、
1)cMOATのヒトゲノムDNAを単離し、幾つかのDubin-Johnsonの家系も含めた患者末梢血で変異が第1と第2のATP結合領域に集中していることを示した。
2)cMOAT・cDNAのCHOやLLCK-PK細胞への導入株を用いてビンクリスチンやシスプラチンに対して耐性を示すことを観察した。また、MRP2はグルタチオン抱合体を輸送しうることを明らかにした。MRP3遺伝子の安定導入細胞株を単離し、感受性試験によりMRP3遺伝子が抗がん剤エトポシドに対する耐性獲得に関与することを明らかにした。
3)大腸癌患者サンプルの癌部、非癌部におけるABCトランスポーターの発現を定量的PCR方にて検討した結果、MDR1,MRP3の発現は癌部にて発現の低下が認められたが、MRP2の発現は、逆に亢進していた。
4)肝炎ウイルス感染患者の肝臓サンプルにおけるABCトランスポーターの発現に関して、定量的PCR法にて検討した結果、MRP2の発現が有意に低下していることを示した。

研究成果

• [文献書誌] Uchiumi,T.,et.al.: "Isolation of a novel human canalicular multispecific organic anion transporter,cMOAT2/MRP3,and its expression in cisplatin-resistant cancer cells with decreased ATP-dependent drug transport."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 252. 103-110 (1998)
• [文献書誌] Toh,S.,et.al.: "Genomic structure of the canalicular multispecitic organic anion transporter(cMOAT)gene and mutations in the ATP binding cassette region in Dubin-Johnson syndrome."Am.J.Human Genet.. 64. 739-746 (1999)
• [文献書誌] Tanaka,T.,et.al.: "Cellular balance of glutathione levels through the expression of γ-glutamylcysteine synthetase and glutathione thiol transferase gene in human hepatic cells resistant to a glutathione poison."Biochim.Biophys.Acta. 1427. 367-377 (1999)
• [文献書誌] Kawabe,T.,et.al.: "Enhanced transport of anticancer agents and leukotriene C4 by the human canalicular multispecific organic anion transporter(cMOAT/MRP2)."FEBS Lett.. 456. 327-331 (1999)
• [文献書誌] Tanaka,T.,et.al.: "The Human Multispecific Resistance Protein2 Gene:Functional Characterization of 5'-Flanking Region and Expression in Hepatic Cells."Hepatology. 30. 1507-1512 (1999)